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文章 · 2024年12月02日
Opentrons Flex 磁珠蛋白纯化工作站进行蛋白定量的流程
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文库构建原理
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蛋白质定量测量方法类别
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Opentrons Flex磁珠蛋白质纯化工作站在BCA(Bicinchoninic Acid,二喹啉甲酸)和Bradford分析中扮演着重要角色,为蛋白质定量分析提供了高效、准确且自动化的解决方案。以下是关于该工作站在BCA和Bradford分析中的具体应用介绍:
一、Opentrons Flex磁珠蛋白质纯化工作站概述
Opentrons Flex磁珠蛋白质纯化工作站基于磁珠提取原理,能够自动化完成小规模蛋白质纯化和蛋白质组学样品处理。它支持多种工作流程,包括酶解或化学裂解实验、蛋白质标记实验、BCA和Bradford检测、质谱前处理以及样本制备等。该工作站具有产出稳定、高效运行和灵活兼容等特点,单次可同时处理多达96个样品,极大地提高了实验效率和准确性。
二、BCA分析在Opentrons Flex工作站中的应用
BCA法是一种基于蛋白质与Cu^2+螯合形成的紫色络合物在特定波长下具有最大光吸收的蛋白质定量分析方法。在Opentrons Flex工作站中,BCA分析的具体应用如下:
1、试剂准备:工作站会自动根据待处理样品的数量,通过移液和混合试剂A和B(或试剂A、B和C,具体取决于试剂盒),准备足够的工作试剂。
2、样品处理:将工作试剂和测试样品转移到96孔透明平底板的各个孔中,然后在Opentrons热振荡模组上进行混匀和孵育。确保检测的信号强度,BCA法通常需要在37°C下孵育。
3、结果分析:使用与Opentrons Flex兼容的读板器(如BioTek Synergy H1读板器)对结果板进行分析,通常在570nm波长下进行吸光值读数。
三、Bradford分析在Opentrons Flex工作站中的应用
Bradford法是一种基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后颜色变化的蛋白质定量分析方法。在Opentrons Flex工作站中,Bradford分析的具体应用如下:
1、试剂准备:与BCA法类似,工作站会自动准备所需的试剂。
2、样品处理:将试剂和样品转移到96孔板中,并在Opentrons热振荡模组上进行混匀。与BCA法不同,Bradford法蛋白质检测通常在室温下进行孵育。
3、结果分析:使用读板器在600nm波长下进行吸光值读数。
四、Opentrons Flex工作站的优势
1、自动化操作:通过编程实现自动化移液、混匀和孵育等步骤,大大减少了手动操作时间,提高了实验效率。
2、标准化流程:建立了标准化的操作流程,确保每次实验都能获得稳定、可靠的结果。
3、高通量处理:单次可同时处理多达96个样品,适用于大规模蛋白质定量分析。
4、兼容性强:与多种常见的基于磁珠的试剂和实验耗材兼容,方便用户选择和使用。
Opentrons Flex磁珠蛋白质纯化工作站在BCA和Bradford分析中展现了出色的性能,应用前景也非常广阔。这款工作站通过高度自动化的操作流程和精确的控制系统,使得蛋白质定量分析变得更准确、更高效。同时,它强大的数据分析功能也显著减少了实验中的人为误差,提升了结果的可靠性。
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