使用 Opentrons Flex™ 核酸提取工作站纯化从细胞或组织样本提取基因组 DNA

应用优势

使用 Opentrons Flex™ 搭配NucleoMag® Tissue 试剂盒，进行纯化核酸的优势：

1.方法经过验证，确保全自动提取纯化过程准确性。
2.产量和纯度重复性好，稳定回收基因组 DNA。
3.处理能力强，可最多同时处理 96个样品。
4.可访问 Opentrons 协议库或通过MACHEREY NAGEL 的自动化技术支持automation-bio@mn-net.com获取更多详细信息。

导言

提取基因组 DNA 是生命科学和应用测试实验室中常见的实验流程，尤其在基因分型测试、测序和临床研究等下游应用中，对 DNA 的质量和纯净度要求严格。
MACHEREY NAGEL 的 NucleoMag® Tissue 试剂盒提供了基于磁珠的快速基因组 DNA 纯化解决方案。该试剂盒设计精简，适用于 96 孔板模式，可为 PCR、NGS 或其他酶反应提供高质量、高纯净度的 DNA 模板。
结合 Opentrons Flex™ 核酸提取工作站，可高效纯化 HeLa 细胞基因组DNA。该工作站配备Opentrons Flex™ 环形磁力架、加热振荡模块，以及5-1000 µL 单通道和 8 通道移液器，还可选择 96 通道移液器，适用于各种样本类型提取 DNA，包括其他真核细胞或组织。
Opentrons Protocol Library 中提供了结合 Opentrons Flex™ 核酸提取工作站与 NucleoMag® Tissue 试剂盒使用的协议，可直接下载使用。

应用说明 NucleoMag® 组织与 Opentrons Flex™

NucleoMag® Tissue 试剂盒的原理是基于核酸在特定结合条件下可逆吸附到 NucleoMag®B-beads 上。在处理高达 20 mg 的组织样本或 1×10^6 个 细胞时，首先加入蛋白酶 K 和裂解缓冲液T1，然后通过加入缓冲液 MB2 促进核酸与磁珠的可逆结合。随后，在磁珠吸附后，使用洗涤缓冲液 MB3 和 MB4 进行洗涤，以去除盐和其他杂质。接着进行干燥步骤或进行 MB5 洗涤，最后使用洗脱缓冲液 MB6 将 DNA 洗脱下来。所有的移液和磁珠纯化步骤都由 Opentrons Flex™ 完成。

应用数据

从HeLa细胞中提取DNA

利用 Opentrons Flex™ 工作站搭配 NucleoMag® Tissue 试剂盒，成功从2.4×10^5 个 HeLa 细胞中提取了高纯度 DNA。通过使 TapeStation 对纯化后的 DNA 进行评估，包括评估 DNA 完整性（DIN）和片段大小分布（虚拟凝胶成像），结果显示 DNA 的平均 DIN 值为9.0±0.09。这表明 Opentrons Flex™ 工作站与 NucleoMag® Tissue试剂盒结合使用，能够稳定地从 HeLa 细胞中提取高质量的 DNA 。

值得信赖的 qPCR 检测结果

通过进行 qPCR 分析（用蓝色条表示），使用 PowerTrackTM SYBR GreenMaster Mix 作为试剂，引物经 IDT 设计，靶向基因组中 β-2- 微球蛋白的一个 190 bp 区域。qPCR 结果显示，在所有测试样本中都能稳定检测到扩增片段，表明这个自动化核酸纯化流程适用于各种常见的基于酶的下游应用。这些结果证明了 Opentrons Flex™ 工作站搭配 NucleoMag® Tissue 试剂盒提取的 DNA 在 qPCR 检测中表现出可靠性。

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