OT-2 吸头长度及移液器偏移校准

　　大家好，我是 Ethan，Opentrons的技术支持负责人，本系列视频是 0T-2从开箱到协议运行系列的第六期。在上期视频中，我们完成了甲板校准，接下来让我们开始在 OT-2 上进行吸头长度校准，在吸头长度和移液器偏移校准操作中，我需要用到校准铝块，我用到的吸头有:20ul和1000ul的型号，我需要用到计算机和 OT-2，移液器已经连接上OT2了，这一步在上期视频已经完成了，吸头长度校准说明了吸头如何适配特定物理移液器的喷嘴，只要校准完成，OT-2 就可以知道如何在协议运行时移液器的上下以及远近移动，从而使吸头保持在正确的高度，吸头长度校准不用考虑各个吸头之间的差异，OT-2 假定每个吸头与同一型号的其他吸头具有-致的长度，我将用到设备应用程序和 Opentrons 应用程序来启动校准。首先选择我要校准的设备，只要我没有完成校准，这里就会提示，提醒我完成移液器偏移校准或吸头连接校准。现在我点击校准，当您第一次开始校准吸头长度和移液器偏移的时候设备会询问您是否需要用到校准铝块，如果您没有校准铝块，您可以使用垃圾槽替代，我现在有这个铝块，所以我会用铝块来校准，我会点击记住我的选择以备下次使用，这样它下次就不会提示了。

　　我将继续使用校准块，OT-2现在将回到起始状态并为校准做好准备，我需要一个吸头架，最好是 0pentrons 的，和一个校准铝块，我摆好了，让我们开始校准。Opentrons 应用程序将引导我完成校准吸头长度校准，我需要把校准铝块和吸头架摆在对应的板位上，移液器Z轴移动到校准块以测量喷嘴，我需要向下移动移液器，以确保喷嘴与校准块的距离小于1毫米，此时喷嘴距离校准块不到1毫米，我会保存此校准结果，移液器将移至吸头架中的第一个吸头位置以拾取吸头，我需要放下移液器，以确保移液器喷像APP士动画展示的那样对齐。喷嘴已对齐，我要让移液器拿起吸头，我的移液器能够拿起吸头，单击移动以测量吸头长度按钮，移液器将移回校准块以测量吸头长度，我需要将移液器移在一个小支架上，以确保它离校准块的距离小于1毫米，喷嘴距离校准块1毫米，现在我将保存吸头长度设置，我将移除校准块以继续进行移液器偏移校准，移液器偏移权准补偿两个移液器之间的距离，基于 OT-2 和移液器的制造差异，每个移液器都有自己的移液器偏移量，我需要校准以确保最高精度的 OT-2 已经附有吸头，所以它将用于校准过程，该应用程序将引导我完成每个移液器的校准。移液器校准的过程与甲板校准类似，首先移动到插槽 5-以测量Z通道，然后我将移动它，使移液器与甲板的距离小于 0.1 毫米，z轴位置距离甲板小于1毫米，我将保存此校准，移液器将移动到板位1中的十字。与甲板校准类似，我需要对齐移液器，使吸头未端位于插槽1中十字的中间，我的一开始有点偏，慢慢移动，这样就对齐了，我将移液器与十字对齐，现在可以保存校准，当“绿色钩子”和移液器偏移完成消息出现时，说明校准完成了。我会让移液器将吸头放回吸头架，然后继续下一个校准，OT-2 现在复位了，到这里左支架上的 P20 移液器的吸买长度校准和偏移校准已完成，我现在要用 P1000 移液器执行相同的过程。首先，我要把 20 μl吸头架从甲板上拿下来，并把它放在一边，我现在将在右侧启动吸头长度校准和移液偏移校准。我进入设备页面的时候可以看到，由于我之前没有校准过右侧的移液支架，有一条提示说我现在需要校准它，我现在点击校准，
　　
　　应用程序会指导我如何进行吸头长度和移液器偏移校准，和上次一样，我需要与移液器相关联的吸头架，在这种情况下它是 1000 μl 吸头架，我需要校准铝块，这些我都有，这次校准开始了，我需要将校准块放在板位1中，在右侧。然后我需要将吸头架放在板位8中，和之前一样，在板位8中取下顶部的吸头架，校准铝块放在板位1中，我们现在可以确认放置并继续校准，P1000 移液器将下降到校准铝块，就像之前的步骤一样，我需要将它缓慢地移动下来，使喷嘴接近但不接触到校准铝块，移液器喷嘴离校准铝块不到 0.1 毫米的距离了，我将保存这个设置，然后继续拾起一个吸头，我现在需要定位移液器，使其位于吸头 A1的中心，移液器的喷嘴现在位于吸头 A1 的中心，并且与吸头的顶部齐平，我现在要让移液器拿起那个吸头，应用程序询问我移液器是否能够拾取吸头，已经成功拾取了，点击确定，然后开始测量吸头长度。我们将移动到板位1中的校准块，慢慢移动，使吸头接近但不要接触到校准铝块，完美！它现在停留在距离校准铝块不到 0.1毫米的距离，我现在将保存这个长度，现在吸头长度已校准完成，应用程序上有一个“绿色钩子”标记，我现在需要从甲板上取下校准铝块，并继续进行移液器偏移校准，所以我会选择继续进行下一步操作，就像甲板校准和之前的移液器偏移校准一样，我需要降低移液器，使其距离板位5中的甲板不到 0.1毫米，移液器吸头已经无限接近5号板位的甲板了，距离不到 0.1毫米。我将保存此校准结果，移液器将移动到第一个板位边缘，我现在需要点击移动机器人，直到吸头正位于第一个板位中的十字中心。现在吸头精确地位于第一个板位的的十字上，保存校准结果，我知道移液器偏移校准已完成，因为屏幕上有一个“绿色钩子”。我现在让移液器将吸头放回吸头架并退出校准。OT-2复位，吸头长度和移液器偏移校准已完成。
　　
　　在协议运行之前，我们本期视频到此结束，感谢收看本系列的第六期，现在我已经校准了移液器长度和移液器偏移量，接下来我们将继续指导如何运行协议。感谢收看，我们下期再见！