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OT-2 协议运行

  大家好,我是 Ethan,Opentrons的技术支持负责人。本期视频是我们从开箱到协议运行系列视频的第7期,上期视频我带大家完成了吸头长度和移液器的偏移校准,接下来我将为大家讲解如何上传和运行协议,为此,我需要准备在协议运行中要使用的所有耗材,我准备了试管架、储液槽和96孔板,我还需要盒装吸头和移液器,我的右侧有一个P1000 单通道移液器,左侧有一个 P20 8通道移液器,最后,在运行协议之前,我要先把垃圾篓放好,垃圾篓将保护金属板免受任何在吸头中掉落倒的液体的影响,为了在 0T-2 上运行协议,我需要将我的移液器连接上 OT-2,并完成甲板、吸头长度和移液器的偏移校准。
  
  开始之前,我需要一个协议,我已经用 Python API创建了一个用于本期视频的协议,您可以在我们的在线协议库中找到,协议的链接可以在视频说明中查看到。这是一个很简单的协议,运行内容是从储液槽中吸取液体分发到孔板中,我们进入应用程序,导入一个协议,我将进入 Opentrons 应用程序,导航到“协议”选项卡,这一步带我们进入协议导入页面,我可以通过拖放文件到应用程序或选择文件上传来导入协议,我选择选择文件上传选项,一个文件预览窗口弹出,我可以选择我已经下载好的协议,当我导入协议之后,应用程序将通过协议分析运行它,这是一个对协议进行本地模拟的过程,目的是获取与元数据和实验甲板布局图相关的特定信息。一旦协议被导入我就可以启动运行,要做到这一点,我需要在协议选项卡中,然后我可以选择3点菜单,点击后显示一个下拉菜单,从中选择运行选项,所以这个列表中只有一个,如果我有多个 0T-2,我选择这台设备并点击“进行设置”,然后就进入协议设置页面,这个页面提供我导入的协议的相关信息。如果您前面几期视频跟着我操作了,那您就知道我们完成了运行所需的设备校准。所以没有必要重做第一步,如果没完成校准,这里会有一个黄色的警告提示需要校准,我简要介绍一下步骤2,实验室器具设置,Opentrons 建议将此实验室器皿设置作为协议设置的一部分,这一步骤主要涉及使用实验室器具位置来检查应用或创建实验室器具偏移,这些偏移是做小的调整,用于移液器定位到特定实验室器具和特定实验板位的正确位置。由于我之前没有在任何实验室器皿上执行过定位检查,我可以继续进行步骤2,正好让我有机会向大家展示实验室器具定位检查是什么以及如何执行。让我们继续进行实验室器具定位检查吧,我一点击开始实验室器具定位检查,OT-2 就会把移液器移动到6号板位的 A1 吸头,我需要定位所有喷嘴与第一列对齐,当 0T2 移动到吸头架上,我需要确保所有喷嘴都处于企确的位置并对齐。如果通道没有完全对齐,我可以点击微调控制。我现在就开始调,因为移液通道存在略微偏离。现在微调控制将显示出来,我要快速调整我的移液器使其对齐。现在我要确认位置,移液器将移动到5号板位,另一根移液器将降下来到达吸头 A1。现在我需要确保 P1000 移液器的喷嘴位于吸头 A1 的中心,喷嘴与吸头的顶部有一些永平方向的偏离。所以我要像之前一样进行微调控制,稍微移动一下,一旦对齐好,我将单击确认定位,拾起吸头OT-2 将尝试拾起吸头,应用程序会问我移液器是否成功地拾起了吸头,它已经拾起了 ,所以我点击确认。它会移动到1号板位,吸头应该位于 A1孔的中心,并且吸头的底部应该与孔的顶部齐平。
  
  我要微调它,因为它有点偏离。所以,我再次需要微调控制吸头定位到A1孔的中心,吸头的底部与孔槽的顶部齐平。我要确认位置,并且移液器会移动到2号板位,它将移动到储液槽的第一列,移液器将移动到储液槽2的 A1 列中,现在我需要将吸头对准A1列孔槽,并确保吸头的底部与孔槽的顶部齐平。有一些偏低,所以我需要微调控制并稍微调整一下,吸头在井 A1 孔槽居中,并且吸头的底部与孔槽的顶部齐平。所以我将确认位置并移动到3号板位,就像前两个步骤一样,它会移动到 A1 孔槽,现在我需要确保吸头对准A1孔位,吸头底部与孔槽的顶部齐平。已经很不错了,但我觉得还可以更好,所以我要微调控制并稍微调整一下。现在这个校准做得非常好,到这里我点击确认定位,移液器将把吸头放回5号板位的吸头架上。它会把针头放下,OT-2 会返回到初始位置。OT-2 复位了,说明实验甲板定位检查完成了。因为我的甲板地图上都有绿色的勾选。现在在我运行的每个实验室器具的偏移量也在这里显示出来了。所以我要关闭屏幕并应用实验室器具偏移数据,在这个DEC地图上可以看到刚校准好的实验室器具偏移数据,现在我回到协议设置选项卡,所有校准都完成了。我可以开始运行了,我们可以点击开始。运行启动!
  
  本期视频到这里就结束了,让 OT-2 继续平静地执行协议。非常感谢您收看本系列的最后一期视频。本期视频总结了让 OT-2 执行协议所需的所有步骤,谢谢收看,再会!

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