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为了确保Opentrons Flex 核酸提取工作站这一先进设备能够持续准确运行,定期进行校准工作显得尤为重要。本文旨在深入探讨Opentrons Flex 核酸提取工作站的校准流程,详细阐述从校准前的充分准备,到执行具体校准步骤的每一个细节,直至最终生成校准记录和报告的全过程。
一、校准前准备
1、确保环境条件:校准应在规定的环境温度(10~30℃)和相对湿度(≤80%)下进行,同时确保环境中没有明显的机械振动和电磁干扰。
2、准备校准工具:
(1)超微量分光光度计:用于测量核酸浓度,以验证提取效率。
(2)振动测量仪:用于测量和校准工作站的振动频率。
(3)温湿度巡检仪:用于监测和记录环境温度和湿度。
(4)电子天平:用于测量取液量的准确性。
二、校准步骤
1、温度校准:
(1)使用温度测量装置,将温度传感器固定在提取仪的加热模块上,确保温度传感器与加热模块贴合紧密。
(2)根据提取仪的孔位数,均匀选取测温点。例如,孔位数48位96位时选7个测温点,8位48位时选5个测温点,8位及以下时选3个测温点。
(3)设定被校提取仪的校准温度,稳定10分钟或以上,待温度稳定后,读取测温点的温度值。
(4)计算温度的示值误差、均匀性和稳定性。
2、振动频率校准:
(1)选取振动频率校准点,通常为提取仪频率设定最大值的20%(低)、50%(中)、80%(高),或其他有实际需求的振动频率。
(2)使用振动频率测量装置进行测量,待提取仪稳定5分钟后,设定待测频率值,分别测量低、中、高提取仪振动频率的示值。
(3)每个频率测量3次,计算振动频率的示值误差和稳定性。
3、取液量校准:
(1)分别设定提取仪取液量为50μL、100μL、200μL,或其他有实际需要的取液量作为校准点。
(2)测量取液量的示值误差、重复性和一致性。
(3)重复性测试时,选择一个通道重复取液7次,用电子天平称量所取液体质量,换算成体积后计算相对标准偏差。
(4)一致性测试时,用提取仪的多通道取液器取液一次,分别称量各通道取液的质量,换算成体积后计算取液量的一致性。
4、核酸提取回收率校准:
(1)选择有证核酸标准物质,用微量分光光度计测量其浓度,取3次测量的平均值作为核酸提取前的初始浓度。
(2)用提取仪对有证核酸标准物质进行核酸提取。
(3)均匀选取测量点进行一致性考察,将每个孔中提取好的核酸样品溶液,分别用微量分光光度计测量其浓度。
(4)对比提取前后的核酸浓度,计算提取回收率及其一致性和重复性。
三、校准记录和报告
1、记录校准数据:详细记录每一步校准的数据和结果,包括温度、振动频率、取液量和核酸提取回收率的测量值、计算值和误差等。
2、生成校准报告:根据记录的校准数据,生成校准报告,包括校准日期、校准人员、校准设备型号和编号、校准结果和结论等信息。
3、评估校准结果:根据校准报告,评估提取仪的性能是否满足使用要求。如不满足,需进行必要的调整或维修。
Opentrons Flex 核酸提取工作站的校准是一个系统而细致的过程,它涵盖了从校准前的准备到具体步骤的执行,再到校准记录和报告的生成等多个环节。通过严格的校准流程,我们可以确保工作站的准确性和可靠性,为后续的核酸提取实验提供坚实的基础。同时,定期的校准也是保持设备性能稳定、延长使用寿命的重要手段。
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