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在现代生物医学研究的快节奏环境中,高效且准确的样本纯化是确保实验成功与数据可靠性的关键步骤之一。Opentrons OT-2自动化移液平台,凭借其卓越的灵活性和可编程性,为实验室带来了前所未有的自动化解决方案。
一、准备工作
1、设备检查:确保OT-2自动化移液平台及其配套模块(如磁珠纯化模块、温控模块、热振荡模块等)已正确安装并校准,处于良好工作状态。
2、耗材准备:根据实验需求准备足够的核酸纯化所需耗材,如磁珠、缓冲液、吸头等,并确保这些耗材与OT-2设备兼容。
3、样本准备:将待纯化的样本按照实验要求进行处理,如提取、稀释等,并放置在OT-2平台上指定的位置。
二、程序设计
1、创建实验协议:使用Opentrons提供的软件(如Opentrons App)创建自动化实验协议。该协议将指导OT-2如何自动执行样本纯化的各个步骤。
2、参数设置:在协议中详细设置每个步骤的参数,包括移液量、移液速度、温度、时间等。这些参数应根据实验的具体要求和所使用的试剂进行调整。
三、执行自动化纯化
1、加载样本:通过OT-2的移液臂将待纯化的样本从原始容器中转移到纯化所需的反应管或板中。
2、磁珠结合:如果采用磁珠纯化法,则利用磁珠纯化模块使磁珠与样本中的目标分子(如DNA、RNA)结合。此步骤可能需要控制温度和时间以优化结合效率。
3、洗涤:通过多次洗涤步骤去除杂质和非特异性结合的分子。洗涤过程中,OT-2将自动移取缓冲液并混合,然后利用磁珠纯化模块的磁力将磁珠与液体分离。
4、洗脱:将目标分子从磁珠上洗脱下来,收集纯化的样本。此步骤同样需要精确控制移液量和时间。
5、其他步骤:根据实验需要,可能还需要进行热振荡、离心等步骤以进一步优化纯化效果。OT-2可通过连接相应的模块来执行这些步骤。
四、实时监控与调整
1、实时监控:在自动化纯化过程中,可以通过Opentrons软件的实时监控功能观察设备运行状态和实验进度。
2、异常处理:如果设备出现故障或实验出现异常情况(如移液量不准确、磁珠沉淀不完全等),应及时停止实验并进行检查和调整。
五、结果收集与分析
1、收集纯化样本:在自动化纯化程序结束后,收集纯化后的样本并进行必要的后续处理。
2、质量检测:对纯化后的样本进行质量检测,如浓度测定、纯度分析等,以确保纯化效果符合实验要求。
3、数据分析:将纯化结果与实验预期进行比较和分析,为后续实验或研究提供参考。
OT-2能够高效、准确地完成样本的自动化纯化工作,提高实验效率和准确性。同时,由于其可定制的模块化设计,OT-2还能够根据实验需求进行灵活配置和优化,为科研人员提供更加便捷、高效的实验解决方案。
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