移液器白皮书：热循环模块

Opentrons 热循环模块 GEN2 可为您的实验提供准确均匀的扩增温度同时维持较低的蒸发率。

产品说明

Opentrons  热循环模块是一个放置在甲板上的全自动化 的热循环仪器，提供了一个96孔板式的全自动 PCR 功能。 热循环模块与所有的 Opentrons 仪器和软件都兼容，所以 可以在 Opentrons  仪器上实现全自动化的 PCR 前处理和PCR 流程。

Opentrons 热循环模块的孔板上配有自动加热盖和可更 换的密封元件，以确保有效的加热样品的同时把样品蒸发 量降到最低。在热循环完成后，通过孔板上升装置使孔板块 上升，然后可以手动或者使用机械转板抓手将 PCR 孔板 移出。排气口将热循环仪中的热空气排出，并将其导向远离机器甲板的地方。

性能数据

Opentrons对热循环模块 GEN2  进行了一系列严格的性能测试，以保障仪器品质遵守行业标准的性能规范

表 1：在稳定状态下温度的准确度和一致性

温度升降速率(变温率)

对8个不同的仪器在加热(到99℃)和冷却(到4℃)期间测量其平均最大温度升降速率。每个定点的保持时间为5分钟。热循环仪的最大平均变温率为4 .45℃/s

性能数据

通过用可重复使用的密封元件，多种反应体系，96孔 PCR板，对仪器的扩增一致性进行了测试。
使用 Lambda 引物扩增 Lambda DNA,热循环参数如下： 在94℃孵育10分钟，25个循环，每个循环分别在94℃ 下扩增15秒和在70 ℃扩增1分钟，并在72 ℃下延伸7 分钟。通过使用读扳机捕获原始荧光值对每个孔槽的扩增量进行了测量。
通过计算得出变异系数 (CV%) 见表2。数据表明，密封圈可以重复使用多达25次，且不会降低性能。在10 μL 和 100μL 反应体积下，CV值均保持较低。此外，使用 OT-2的 96孔PCR 板，在10uL 到100uL 这个较大的范围区间内，热循环模块都具有较好的扩增重复性。

低蒸发率

对 5 0 个不同的热循环模块的蒸发率进行了评估，在 PCR 96孔板中样品的体积分别为10μL,20μL,50μL  和100 μL。在 PCR 运行3步前后分别测量了样品的体积重量；包 括35次循环，每次循环的设定温度和保持时间为：94℃(10 s)、70 ℃(30s)和72℃(30s)。

所有测试样品体积的平均蒸发率均<6%,最大样品体积(100μL)平均蒸发率均<1%。

数据表明，Opentrons    热循环模块 GEN2 有着一致可靠的扩增功能，最小样品体积损失低至仅10 μL。该模型展示了温度快速 升降速率和在各种不同的设定点对温度的稳定保持能力。在重复使用一次性密封圈，使用多种反应体积，和无论是否在机制备样品的情况下，96 孔板的扩增均被证明是一致均匀的。Opentrons  热循环仪 GEN2  的 9 6 孔 位 PCR 通过各种测试证明其提供了可重复和准确的扩增结果，以保证实验室日常实验的一致性。

原文地址：移液器白皮书：热循环模块