全自动 NGS 文库制备：Opentrons Flex 工作站操作教程

随着高通量测序（NGS）技术在科研和临床检测领域的不断普及，文库制备流程的效率与稳定性成为影响测序结果质量的关键因素。传统手工文库制备步骤繁多、耗时长且易受人为因素影响。Opentrons Flex 工作站通过全自动化操作，为 NGS 文库制备提供了一种高效、稳定且可复制的解决方案。本文将围绕 Opentrons Flex 工作站，介绍全自动 NGS 文库制备的基本操作流程和使用要点。

移液工作站

全自动 NGS 文库制备的优势

NGS 文库制备通常包括核酸定量、片段化、末端修复、接头连接、纯化及文库扩增等步骤，对移液精度和流程一致性要求极高。引入自动化工作站后，可以显著减少人工移液操作，降低实验人员劳动强度，同时提升样本处理的一致性和可重复性。

使用 Opentrons Flex 工作站进行全自动文库制备，不仅能提升实验效率，还能有效降低移液误差和样本交叉污染风险，特别适合高通量样本处理场景。

Opentrons Flex 工作站基础准备

在正式运行文库制备流程前，需要对 Opentrons Flex 工作站进行基础准备。首先，根据实验方案选择合适的移液模块、磁力模块和温控模块，并确认其安装位置正确。其次，准备好所需耗材，包括枪头、反应板、磁珠和试剂，并按照流程要求放置在指定槽位。

在软件端，需要提前加载或编写对应的文库制备程序，确保每一步移液体积、混匀方式和孵育时间均设置准确。

文库制备自动化流程说明

启动程序后，Opentrons Flex 工作站将按照预设步骤自动完成文库制备流程。系统会首先进行样本和试剂的精准移液，随后完成酶反应所需的混匀与孵育操作。

在涉及磁珠纯化步骤时，磁力模块可自动吸附磁珠，实现上清移除和洗涤，保证纯化效率和一致性。整个流程无需人工干预，大幅降低操作错误概率。

操作过程中的关键注意事项

尽管 Opentrons Flex 实现了高度自动化，但在操作过程中仍需注意一些关键细节。例如，试剂配制应严格按照试剂盒说明进行，避免浓度偏差影响文库质量。同时，耗材规格需与程序设置匹配，确保移液精度。

此外，运行前应检查枪头库存是否充足，避免因耗材不足导致流程中断。定期校准移液模块，也有助于长期保持实验结果的稳定性。

提升文库制备成功率的实用技巧

为了进一步提高文库制备成功率，建议在正式大规模运行前，先使用少量样本进行流程验证。通过检测文库片段长度分布和浓度，评估自动化流程是否符合预期。

同时，合理安排样本批次，有助于最大化 Opentrons Flex 工作站的高通量优势，提升整体实验效率。

适用场景与实验室价值

Opentrons Flex 工作站适用于科研机构、第三方检测实验室以及生物医药企业，尤其适合需要频繁进行 NGS 文库制备的高通量实验室。通过全自动文库制备，不仅可以提升实验效率，还能实现流程标准化，为数据分析和结果比对提供可靠基础。

结语

总体来看，Opentrons Flex 工作站为全自动 NGS 文库制备提供了一套高效、稳定且灵活的解决方案。通过规范的操作流程和合理的系统配置，实验室可以显著提升文库制备效率，降低人为错误风险，实现真正意义上的自动化升级。随着 NGS 技术的持续发展，Opentrons Flex 将在实验室自动化领域发挥越来越重要的作用。

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