血浆样品前处理的方法

在生物医学研究、药物分析以及临床诊断等领域，血浆样品作为分析对象扮演着至关重要的角色。血浆，作为血液的液态部分，富含各种生物分子，包括蛋白质、脂质、代谢物以及可能的药物残留等。然而，这些丰富的成分也带来了分析上的挑战，因为其中的许多物质都可能作为干扰因素，影响目标分析物的准确测定。因此，血浆样品的前处理成为了确保实验结果可靠性和准确性的关键环节。

一、一般处理方法
1、抗凝搜集血浆：
搜集抗凝全血后，轻轻倒置以确保充分抗凝，然后可直接低速离心分离血浆（也可静置半小时左右再离心）。离心时应选择合适的离心力和时间，以避免溶血。
实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠，需根据实验需求选择合适的抗凝剂。
2、低温冻存：
分离出的血浆可以冷冻保存，但在解冻后如出现絮状浑浊，应离心去除后再进行测定。

二、去除干扰物质的方法
1、稀释加热法：
血浆用溶解水进行3~10倍稀释，然后在37~100℃水中进行加热处理，保温时间一般在5~10分钟。这种方法可以去除或降低某些热敏性干扰物质的含量。
2、氯仿提取法：
血浆加等量的氯仿后振动一段时间（如3小时），然后取上层进行检测。氯仿能有效提取和分离出某些脂溶性干扰物质。
3、乙醚处理法：
血浆加入乙醚处理并在适当温度下（如40℃）保温，然后将乙醚去除。乙醚可以去除或降低血浆中的某些挥发性干扰物质。
4、三氟代乙酸法：
血浆中加入乙酸调节pH至4.0，然后用K2HPO4调节pH到7~7.5。这种方法可以改变血浆的酸碱环境，从而影响某些干扰物质的稳定性和活性。
5、表面活性剂处理法：
类似于稀释加热法，但将稀释用水改为表面活性剂。表面活性剂可以破坏血浆中的某些膜结构，释放出被膜包裹的干扰物质。
6、凝胶过滤法：
利用凝胶的分子筛作用，将血浆中的不同分子大小的物质进行分离。这种方法可以有效去除大分子干扰物质。
7、碱性处理法：
血浆用一定浓度的碱液（如0.2N NaOH）在适当温度下（如37℃）保温一段时间（如10分钟），然后用酸液（如HCl）中和。碱性环境可以改变某些干扰物质的化学性质，使其更易于去除或降低其活性。
8、Beads法：
将吸附特定干扰物质的特殊树脂（如吸附内毒素的树脂）放入血浆中，待其充分吸附后取出，再加入适当的试剂进行后续反应。这种方法可以针对性地去除血浆中的特定干扰物质。

三、针对特定目标物的前处理方法
如果血浆样品的前处理是为了测定某个特定目标物（如弱碱性药物），则可能需要采用更为针对性的前处理方法。例如：
1、使用三氯乙酸或高氯酸等沉淀血浆蛋白质，然后取上清液进行后续处理。
2、调节pH值至弱碱性以使目标药物游离出来，再加入有机溶剂进行提取和纯化。

血浆样品前处理是生物医学研究、药物分析及临床诊断中不可或缺的一环。通过采用合适的前处理方法，我们能够有效地去除或降低血浆中的干扰物质，保护并富集目标分析物，从而为后续的实验分析提供高质量的样品。