Flex应用专题 | 解锁蛋白质谱前处理自动化的无限潜能
查看详情MALDI-TOF 是一种 “软电离 ”技术,非常适合分析蛋白质和肽等大型生物分子,而不会造成碎裂。通过将样品与基质混合并使用激光脉冲,它可以使样品离子化。它的主要优势在于能够快速分析大分子,因此在蛋白质组学和微生物鉴定方面特别有用。
ESI 的工作原理是将样品溶液通过高压针,产生带电液滴,从而产生离子。它的多功能性非常突出,可以电离从小分子到大蛋白质的各种化合物。ESI 与液相色谱法(LC)兼容,可实现无缝分离和后续 MS 分析,是代谢组学和脂质组学的首选。
MS/MS 分为两个阶段,首先分离离子,然后对选定的离子进行碎片化,最后对碎片进行分析。其优势在于提供详细的结构信息,尤其是肽的结构信息。通过瞄准特定离子并监测其碎片,MS/MS 提供了无与伦比的特异性和精确性,使其在蛋白质组学和精确定量分析方面具有无可估量的价值。
为质谱分析准备生物样本的过程。这包括从复杂混合物中提取、纯化和浓缩相关分子。其主要目的是确保样品的形态适合质谱分析,不含可能干扰质谱读数的污染物,并且浓度足以被检测到。
气相色谱-质谱仪专门分析挥发性和热稳定性化合物。它融合了气相色谱法的分离能力和质谱法的鉴定能力,通常用于法医、环境监测和风味分析。它的优势在于利用完善的库对有机化合物进行精确鉴定。
液相色谱-质谱法将质谱法的适用范围扩展到热敏性和非挥发性化合物。通过将液相色谱的广泛分离能力与详细的质谱分析相结合,液相色谱-质谱法在蛋白质组学、药物开发和代谢物分析中变得非常有价值。它能够处理更大、更多样的分子,弥补了 GC-MS 的不足。
GC-MS | LC-MS | |
概述 | 气相色谱与质谱联用 | 液相色谱与质谱联用 |
样品类型 | 挥发性和热稳定化合物 | 非挥发性和热不稳定化合物 |
电离技术 | 电子轰击电离(EI)、化学电离(CI) | 电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI) |
应用 | 法医学、环境监测、药物检测、风味分析 | 蛋白质组学、药物开发、代谢产物分析 |
复杂性与维护 | 中等;维护主要集中在柱子和质谱的条件上 | 较高;可能出现柱子堵塞和污染 |
分辨率 | 高(取决于柱子和仪器) | 高(取决于柱子和仪器) |
典型用途 | 药物检测、环境污染物、代谢组学 | 生物分子、肽类、药物、大型有机分子 |
检测器灵敏度 | 对挥发性化合物灵敏度高 | 灵敏度高,尤其是现代检测器,适用于更广泛的化合物 |
优点 | 对各种挥发性有机化合物有效,方法成熟且具有完善的数据库 | 适用范围广,可以处理较大和更多样的化合物 |
局限性 | 仅限于挥发性和热稳定化合物,电离时可能产生碎片化使光谱复杂化 | 由于多步骤操作,可能导致样品损失或降解,灵敏度可能受基质效应影响 |
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