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磁珠纯化仪的操作方式可细分为精细的手动操作模式与高效的自动操作模式,每种模式均具备其独特的操作流程与优势。接下来将分别介绍这两种模式的不同操作方法:
一、手动操作模式
1、实验准备:
1>确保磁珠充分分散:初次使用时,在涡旋振荡仪上震荡磁珠3分钟,或使用其他方法使磁珠均匀悬浮。
2>准备样本和试剂:将待纯化的DNA或RNA样本准备好,同时准备所需的裂解液、洗涤液和洗脱液等试剂。
2、样本处理:
1>根据样本类型进行预处理,如咽拭子样本可直接使用,痰液样本可能需要加入蛋白酶K并加热处理。
2>将处理好的样本加入到含有磁珠的试管或孔板中,并加入适量的裂解液和乙醇等试剂。
3、磁珠结合:
1>通过涡旋或颠倒混匀使磁珠与样本中的核酸充分结合。
2>将试管或孔板置于磁力架上,使磁珠被磁力吸附,从而与溶液中的杂质分离。
4、洗涤:
1>使用洗涤液洗涤磁珠,去除杂质和未结合的核酸。此步骤可能需要重复多次,以确保洗涤效果。
2>每次洗涤后,将试管或孔板置于磁力架上,吸去洗涤液。
5、洗脱:
1>向试管或孔板中加入适量的洗脱液(如Buffer EB或去离子水),并轻轻吹打使磁珠重悬。
2>将试管或孔板置于室温下孵育一段时间,使核酸从磁珠上洗脱下来。
3>再次将试管或孔板置于磁力架上,小心吸取上清液至新的离心管中,即为纯化后的核酸样本。
二、自动操作模式
对于配备有自动化控制系统的磁珠纯化仪,操作通常更加简便和高效。以下是一个典型的自动操作模式流程:
1、仪器准备:
1>打开磁珠纯化仪的样品仓,将磁棒套安装到磁棒套筒支架上。
2>将试剂盒托盘拉出,将装有磁珠、清洗液和洗脱液等试剂的试剂盒放到托盘上,然后将3>托盘推回仪器内并关闭样品仓。
2、样品加载:
1>将待纯化的样本加入到试剂盒的指定位置。
3、启动程序:
1>在磁珠纯化仪的控制界面上点击开始按钮,仪器将自动进行样品扫码和识别。
2>扫码完成后,仪器将按预定程序自动进行样品纯化操作,包括磁珠结合、洗涤和洗脱等步骤。
4、结果收集:
1>程序运行结束后,纯化后的核酸样本将被收集在试剂盒的指定位置或转移到新的离心管中。
5、后续处理:
1>将收集到的核酸样本进行后续实验或保存备用。
以上磁珠纯化仪的操作方式仅作为参考,不同品牌和型号的磁珠纯化仪在操作方法上可能有所差异,所以在实际操作中应参考具体仪器的使用说明书进行操作。
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