高通量 NGS 建库流程中的关键步骤与 Opentrons Flex 支持

在高通量测序应用不断扩展的背景下，NGS 建库流程的稳定性和效率，已经成为影响测序结果质量的重要因素。相比低通量实验，高通量 NGS 建库在样本数量、操作一致性和时间控制方面提出了更高要求。通过自动化平台实现流程标准化，已成为越来越多实验室的选择。围绕高通量 NGS 建库的关键步骤，Opentrons Flex 在多个环节中提供了有效支持。

移液工作站

样本分装与体积控制是高通量基础

高通量 NGS 建库往往从数十到数百个样本同时开始，样本分装的准确性直接影响后续反应体系的稳定性。人工操作在长时间重复移液过程中，容易出现体积偏差或交叉污染。Opentrons Flex 通过高精度移液系统，实现对微量样本的重复、稳定分配，确保每个反应孔的起始条件一致。

在高通量场景下，这种一致性有助于降低样本间差异，为后续建库步骤打下基础。

酶反应步骤对温控与时间要求严格

片段化、末端修复和加 A 等酶反应步骤，对温度和反应时间极为敏感。高通量建库中，如果不同批次或不同孔位存在温控偏差，容易导致文库片段分布不均。Opentrons Flex 通过集成温控模块，在同一平台内完成反应准备与孵育操作，减少样本转移带来的变量。

自动化流程能够精确控制反应时间，避免因人为延迟而影响建库一致性。

接头连接与混匀一致性影响文库质量

在接头连接步骤中，混匀方式和移液精度直接关系到接头连接效率。高通量实验中，人工逐孔混匀难以保持统一标准。Opentrons Flex 可在协议中设定固定的混匀参数，确保每个样本在相同条件下完成接头连接反应。

这种可重复的混匀与移液方式，有助于提高高通量文库的整体均一性。

磁珠纯化是高通量流程中的关键节点

磁珠纯化几乎贯穿整个 NGS 建库流程，是去除杂质和控制片段大小的重要环节。在高通量操作中，磁珠分离和洗涤步骤繁琐，手工操作不仅耗时，也容易出现吸液不彻底或样本损失。Opentrons Flex 配合磁性模块，可自动完成磁珠吸附、洗涤和洗脱流程，减少人为差异。

自动化磁珠操作在多样本并行处理时，显著提升了效率和一致性。

PCR 扩增与批量一致性控制

PCR 扩增是高通量 NGS 建库的最后关键步骤之一，对加样顺序和反应条件一致性要求较高。Opentrons Flex 能在扩增前完成 PCR 体系的自动配置，确保各孔反应组分比例一致，为后续扩增提供稳定条件。

在高通量实验中，这种自动化配置有助于减少扩增偏倚，提高文库数据的可比性。

自动抓手提升整体流程连贯性

高通量 NGS 建库涉及多块板之间的频繁切换。Opentrons Flex 的自动抓手功能可在协议中完成板位转移，减少人工干预。这种连贯式操作不仅提升效率，也降低了因人工操作带来的污染风险。

总结

高通量 NGS 建库流程涉及多个对精度和一致性要求极高的关键步骤。Opentrons Flex 通过精准移液、模块化硬件支持、自动化磁珠处理以及流程连贯控制，为高通量建库提供了稳定可靠的自动化基础。对于需要长期开展多样本 NGS 项目的实验室而言，这种支持不仅提升了效率，也为数据质量的稳定输出提供了有力保障。

相关阅读推荐

Opentrons Flex 如何支持多种 NGS 建库协议？

科研实验如何利用 Opentrons Flex 提升效率与重复性

Opentrons Flex 自动化 NGS 文库制备常见问题解答

Opentrons Flex 高通量 NGS 工作站安装与调试全流程

实验室如何利用 Opentrons Flex 实现高质量数据输出

Opentrons Flex vs 其他自动化 NGS 工作站对比评测