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微孔板作为生物实验中常用的工具,广泛应用于酶联免疫吸附实验(ELISA)、细胞培养、药物筛选等多个领域。为了确保实验结果的准确性和可靠性,微孔板的清洗工作至关重要,清洗不当可能会导致交叉污染或实验误差。
一、准备阶段
1、确认孔板材质:首先确认微孔板的材质,因为不同材质的孔板可能需要不同的清洗方法。常见的材质包括聚苯乙烯(PS)和聚丙烯(PP)等塑料材质。
2、准备清洗工具:准备好清洗所需的工具,如移液器、排枪(或吸头)、洗瓶、吸水纸、试管架等。同时,确保清洗溶液(如PBS缓冲液或其他适当的溶液)已经配制好并放置在合适的位置。
二、清洗步骤
1、吸出孔内液体:使用移液器或排枪将孔内的液体吸出,注意不要触碰到孔底的细胞或残留物。如果孔内有贴壁细胞,可以使用胰酶消化后吹打成悬液再吸出。
2、加入清洗液:使用排枪向每个孔内加入足量的清洗液,通常为每孔200~300μl(具体体积可根据实验需求调整)。注意要沿着孔壁缓缓加入,避免产生气泡。
3、浸泡与振荡:让清洗液在孔内浸泡一段时间(如2~3分钟),然后轻轻振荡孔板几次,或使用摇床进行振荡,以帮助去除残留物。
4、吸出清洗液:再次使用移液器或排枪将孔内的清洗液吸出,注意同样不要触碰到孔底。如果有必要,可以重复上述清洗步骤一次或多次,直到孔板清洗干净为止。
5、拍干或风干:将清洗干净的微孔板放在吸水纸上轻轻拍打几次以去除残余的清洗液,或者将其放在超净台上晾干。注意不要使用纸巾擦拭孔板底部,以免影响读数或造成划痕。
三、注意事项
1、避免交叉污染:在清洗过程中要注意避免交叉污染,特别是当处理多个不同样本时。建议每次只处理一个样本的孔板,并在处理完一个样本后更换新的移液器吸头和手套。
2、控制清洗力度:在清洗过程中要注意控制力度,避免过度用力导致孔板损坏或细胞脱落。
3、选择合适的清洗溶液:根据实验需求选择合适的清洗溶液,并确保其pH值和离子浓度适合细胞生长或后续实验。
4、定期维护洗板机:如果使用洗板机进行清洗,需要定期维护设备,如检查管路是否通畅、是否有漏液现象等,以确保设备的正常运行和清洗效果。
清洗微孔板是一项细致且重要的工作,直接影响到实验的质量和可靠性。通过合理的清洗步骤,如初步冲洗、清洗孔板表面、彻底去除清洁剂残留及正确干燥存储,可以有效延长微孔板的使用寿命,并保持其性能不受影响。
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