如何使用环形磁力架进行移液实验操作?

随着磁珠技术在DNA提取、RNA纯化、NGS建库等生命科学领域的普及,磁力架已成为分子实验中的核心设备之一。其中,环形磁力架因其360°对称磁场设计、适配多孔板的能力,成为高通量移液实验中的理想选择。那么,如何规范使用环形磁力架进行移液实验?本文将从准备、操作、注意事项等方面详细解读,助你提升实验效率与数据准确性。

移液工作站

一、环形磁力架的基本结构与优势
环形磁力架(Ring Magnetic Stand)通常由多个环状排列的高强度磁铁组成,能够快速将悬浮在溶液中的磁珠吸附至管壁或孔板边缘。其主要优点包括:
磁场均匀,可实现360度无死角吸附;
高适配性,适合96孔PCR板、1.5ml离心管;
自动化兼容性好,可集成至Opentrons、Hamilton等液体工作站。
这种磁力架特别适合对时间、重复性要求高的样本前处理工作。

二、实验前的准备工作
选择合适的磁力架尺寸与类型:确保与你所使用的板型(PCR板、深孔板)匹配;
检查磁力架状态:避免有磁铁松动或磁力减弱;
准备磁珠试剂与吸头:使用厂家推荐的磁珠,准备低吸附吸头以防液体残留;
设定好移液程序参数(手动或自动):确保吸液高度不触碰磁珠区域。

三、环形磁力架的标准操作流程
第一步:加入样品和磁珠
将样品液和磁珠均匀混合后加入反应孔中。混匀方法包括轻吹打或使用自动摇匀模块。确保磁珠充分与目标物结合。
第二步:放置于环形磁力架上吸附
将板放入磁力架中,静置2-5分钟,让磁珠充分吸附。理想情况下,磁珠会被吸附在孔壁一侧,液体则较为清澈。
第三步:移除上清
使用移液器轻柔地将液体从孔中移出,吸头应靠近液面、避免触碰磁珠团。对于自动化平台,设定吸液高度和速度至安全范围(如保留1-2mm缓冲距离)。
第四步:洗涤步骤
加入洗涤液(如70%乙醇),轻混后再次吸附。重复吸附和上清移除2-3次,以彻底去除杂质。每次洗涤后都需更换吸头,防止交叉污染。
第五步:目标物洗脱
移除最后一次洗涤液后,短暂风干(避免过干),加入洗脱缓冲液,将磁力架移开,使磁珠重新悬浮,混匀提取目标物。

四、注意事项与常见问题
避免磁珠残留:操作中吸头不应深入接触磁珠区域,建议设置安全吸液高度;
防止干珠:洗涤后勿长时间风干磁珠,否则影响洗脱效率;
检查磁力架清洁度:使用后应清理表面残液,防止腐蚀或磁珠沉积;
定期检测磁力:磁力减弱会导致吸附不完全,可用高斯计检测或观察磁珠吸附速度判断。

五、自动化平台中的环形磁力架应用
现代实验室常将环形磁力架集成至自动化液体处理流程,如Opentrons Flex、KingFisher平台等。自动化使用时建议:
设定磁吸时间充足(通常大于180秒);
配合“tip touch”、“slow aspirate”等参数优化吸液流程;
定期校准板位与移液高度,确保吸头精准避开磁珠。
通过软件控制磁吸时间与吸液路径,可显著提高重复性与实验成功率。

环形磁力架凭借其独特结构,在磁珠实验中提供了高效、均匀的吸附能力。正确使用环形磁力架进行移液实验,不仅可以显著提升分离效率,还能降低实验误差。通过规范的操作流程、细致的参数设定与定期维护管理,实验人员可以充分发挥磁珠技术的优势,保障下游分析结果的准确可靠。

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