C18フィラーをきれいにする方法

C18フィラーをきれいにする方法は？ C18フィラーは、一般的に使用される逆相クロマトグラフィーフィラーであり、液体クロマトグラフィ分析で広く使用されています。その表面には長鎖アルキル基があるため、サンプルに不純物を吸着させるのは簡単であるため、C18フィラーの定期的なクリーニングは、分離性能を確保するための重要なステップです。

c18 filler

1。従来の洗浄方法1。溶媒すすぎ：適切な純粋な溶媒（メタノール、アセトニトリルなど）を使用して、適切な流量（通常は1〜2 mL/min）でクロマトグラフィーカラムをすすぎます。フラッシング時間は、クロマトグラフィーカラムの汚染度と必要なフラッシング効果、一般に15〜30分に従って調整できます。この方法は、クロマトグラフィーカラムの表面に明らかな汚染がない状況に適しており、カラム内の不純物を効果的に除去できる。 2。溶媒勾配すすぎ：溶媒の比率を徐々に変更することにより、異なる割合の有機溶媒と水を携帯電話として使用してクロマトグラフィーカラムをすすぐ。当初、有機溶媒の割合が低い（80％の有機溶媒濃度など）が使用され、その後、有機溶媒の割合が徐々に100％に増加します。溶媒の比率と流量は、フラッシング効果の均一性を確保するために安定している必要があります。この方法は、カラムの汚染が重度であり、カラム内の残基をより徹底的に除去できる場合に適しています。

2。特定の汚染のための洗浄方法1。緩衝塩沈殿によって引き起こされる汚染：有機相に不溶性の緩衝塩（リン酸塩など）の使用により、カラムをブロックすると、約60°Cの温水で長時間、低流量で温水で最初に洗浄することができます。緩衝塩がクロマトグラフィーカラムで沈殿している場合は、カラム温度を上げて、水相または純粋な水相の大部分を長時間洗浄しようとすることもできます。最も一般的な慣行は、5％メタノール（またはアセトニトリル）水溶液で10カラムのボリュームを洗い流して、緩衝塩と極性化合物残基を除去することです。 2。従来の有機汚染：最初に5％メタノール（アセトニトリル）水溶液を含む10列の容積を洗い、クロマトグラフィカラムの緩衝塩といくつかの極地化合物を洗浄します。次に、純粋なメタノールまたは純粋なアセトニトリルで10〜20列のボリュームをすすぎ、疎水性不純物をすすぎます。圧力がまだ高い場合、流量は適切に低下し、フラッシング時間を延長することができます。上記の方法が効果的でない場合は、10〜20列のボリュームをすすぐために、イソプロパノール（またはテトラヒドロフラン）を選択できます。 3。タンパク質ペプチド閉塞：0.1％トリフルオロ酢酸（TFA）を洗浄移動相に加えて、吸着タンパク質の溶出能力を高めることができます。問題を解決できない場合は、100μlのトリフルオロエタノールをクロマトグラフィーカラムに注入してみてください。

3.クロマトグラフィーカラムの再生と逆の接続1。再生：一連の溶媒（10％メタノール、アセトニトリル、イソプロパノールなど）を使用して、低流量でカラムをすすぎ、各溶媒を一定期間（4時間など）洗浄します。再生プロセス中に、汚染物質汚染を防ぐために、接続法と検出タンクに注意を払う必要があります。 2。逆の接続：クロマトグラフィーカラムの逆の接続と、低流量でのアセトニトリルなどの溶媒で一定期間（6時間など）洗浄します。逆の接続は、列が廃棄される前の最後の闘争であり、逆接続後に正式な接続で使用することはできません。

4。注1。溶媒の選択：使用する溶媒がクロマトグラフィーであることを確認し、使用前に超音波処理によって泡を除去します。 2。流量制御：フラッシングプロセス中に、カラムの耐性圧力と溶媒の粘度に基づいて、適切な流量を選択する必要があります。 3。カラム温度制御：洗浄プロセス中に、洗浄効果を高めるためにカラム温度を適切に上げます。 4.塩の汚染を避ける：塩が貯蔵中にクロマトグラフィーカラムに損傷を与える可能性があるため、長期貯蔵中に塩を含む携帯電話の位相の使用を避けてください。 5。定期的なメンテナンス：クロマトグラフィー列を定期的に清掃して維持して、サービスの寿命を延ばし、分離効果を維持します。

C18フィラーのクリーニングは、長期的な安定性と効率的な分離性能を確保するための重要なステップです。適切な洗浄剤を選択し、洗浄条件を最適化し、適切な洗浄方法を採用することにより、フィラーの表面に汚染物質と残留物を効果的に除去し、元の分離能力とサービス寿命を復元できます。

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