質譜樣品前處理方法及步驟

質譜樣品前處理方法及步驟是確保質譜分析準確性和可靠性的關鍵環節。在進行質譜分析之前，對樣品進行適當的預處理是至關重要的，因為它能夠去除樣品中的干擾物質，富集目標分析物，並調整樣品至適合質譜分析的狀態。以下將詳細介紹幾種常用的質譜樣品前處理方法及其操作步驟，這些方法涵蓋了從簡單稀釋到複雜固相萃取的多種技術，旨在滿足不同樣品類型和分析需求。

一、樣品前處理方法1、稀釋法（1）方法描述：將樣品以LC-MS相容的溶劑進行稀釋，使樣品中的目標物濃度達到儀器檢測範圍。 （2）優點：操作簡單，相容性強，幾乎所有分析物均有較高的回收率。 （3）缺點：沒有選擇性，樣品中所有成分都會進入LC-MS系統。

2.蛋白質沉澱法（PPT）（1）方法描述：透過添加有機溶劑（如甲醇、乙醇、乙腈等）使樣品中的蛋白質沉澱，從而去除蛋白質等大分子雜質。 （2）優點：操作簡單、成本低、易於實施。 （3）缺點：僅去除了蛋白質，內源性雜質並未完全去除，長時間檢測可能對色譜柱和儀器壽命產生影響；處理後的樣本濃度會被稀釋，不適用於濃度低的目標物和質譜響應偏低的情況。 （4）步驟：取適量樣品加入離心管中。依比例加入沉澱試劑（如乙腈或甲醇），渦旋混勻。離心，取上清液進行後續分析。

3.液-液萃取法（LLE）（1）方法描述：基於目標分析物在互不相溶的溶劑之間的分配係數不同，將目標物從一種溶劑轉移到另一種溶劑中。 （2）優點：選擇性強，適用於非極性至中等極性的分析物，能起到富集濃縮效果，降低基質效應，成本低，方法易轉移，開發時間較短。 （3）缺點：不適用於親水極性物質，操作中易污染，耗時較長。 （4）步驟：取適量樣品加入分液漏斗中。加入適量萃取溶劑，振盪混勻。靜置分層，收集有機相或水相進行後續分析。

4.固相萃取法（SPE）（1）方法描述：將樣品上樣至固相萃取柱上，目標分析物經由吸附作用保留在管柱上，而雜質則被洗脫。 （2）優點：適用於極性到非極性多種類型化合物，可自動化操作，可富集微量樣品分析。 （3）缺點：操作繁瑣，耗時長，成本高，需要豐富的操作技巧和分離科學知識。 （4）步驟：活化固相萃取柱。將樣品上樣至萃取柱上。用淋洗液洗去雜質。以洗脫液洗脫目標分析物進行後續分析。

5.免疫親和萃取法（IA-SPE）（1）方法描述：利用特異性抗體與目標分析物結合的原理進行萃取。 （2）優點：選擇性特異性高，靈敏度高，重現性佳。 （3）缺點：操作繁瑣，耗時長，成本高昂。 （4）步驟：活化免疫吸附劑。將樣品上樣至免疫吸附劑上。淋洗去除非特異性吸附的雜質。洗脫目標分析物進行後續分析。

二、注意事項1、樣本類型：不同樣本類型（如細胞、組織、體液等）的前處理方法可能有所不同，需根據樣本特性選擇適當的方法。 2.目標分析物性質：了解目標分析物的理化性質（如脂水分配係數、酸鹼度、溶解度等）對於選擇合適的前處理方法至關重要。 3.儀器相容性：確保前處理過程中使用的溶劑和試劑與質譜儀器相容。 4.操作規範：嚴格依照操作規程進行前處理操作，避免引入污染及誤差。

質譜樣品前處理涉及多個環節，每個步驟都至關重要。做好樣品前處理工作，才能確保後續質譜分析的準確性和可靠性。希望本文的介紹能幫助您更能理解質譜樣品前處理的方法及步驟。