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血漿樣本前處理的方法

在生物醫學研究、藥物分析以及臨床診斷等領域,血漿樣本作為分析對象扮演著至關重要的角色。血漿,作為血液的液態部分,富含各種生物分子,包括蛋白質、脂質、代謝物以及可能的藥物殘留等。然而,這些豐富的成分也帶來了分析上的挑戰,因為其中的許多物質都可能作為幹擾因素,影響目標分析物的準確測定。因此,血漿樣本的前處理成為了確保實驗結果可靠性和準確性的關鍵環節。

血浆样品前处理的方法

一、一般處理方法1、抗凝血收集血漿:蒐集抗凝血全血後,輕輕倒置以確保充分抗凝血,然後可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再離心)。離心時應選擇適當的離心力和時間,以避免溶血。實驗室常用的抗凝血劑有肝素的各種鹽類、EDTA及枸櫞酸鈉,需依實驗需求選擇適合的抗凝血劑。 2.低溫凍存:分離出的血漿可以冷凍保存,但解凍後如出現絮狀渾濁,應離心去除後再測定。

二、去除乾擾物質的方法1.稀釋加熱法:血漿用溶解水進行3~10倍稀釋,然後在37~100℃水中加熱處理,保溫時間一般在5~10分鐘。這種方法可以去除或降低某些熱敏性幹擾物質的含量。 2.氯仿萃取法:血漿加等量的氯仿後振動一段時間(如3小時),然後取上層進行檢測。氯仿能有效萃取分離出某些脂溶性幹擾物質。 3.乙醚處理法:血漿加入乙醚處理並在適當溫度下(如40℃)保溫,然後將乙醚去除。乙醚可以去除或降低血漿中的某些揮發性幹擾物質。 4.三氟代乙酸法:血漿中加入乙酸調節pH至4.0,再以K2HPO4調節pH到7~7.5。這種方法可以改變血漿的酸鹼環境,進而影響某些幹擾物質的穩定性和活性。 5.界面活性劑處理法:類似稀釋加熱法,但將稀釋用水改為界面活性劑。界面活性劑可以破壞血漿中的某些膜結構,釋放出被膜包覆的干擾物質。 6.凝膠過濾法:利用凝膠的分子篩作用,將血漿中不同分子大小的物質分離出來。這種方法可以有效去除大分子乾擾物質。 7.鹼性處理法:血漿用一定濃度的鹼液(如0.2N NaOH)在適當溫度下(如37℃)保溫一段時間(如10分鐘),然後用酸液(如HCl)中和。鹼性環境可以改變某些幹擾物質的化學性質,使其更易於去除或降低其活性。 8.Beads法:將吸附特定乾擾物質的特殊樹脂(如吸附內毒素的樹脂)放入血漿中,待其充分吸附後取出,再加入適當的試劑進行後續反應。這種方法可以針對性地去除血漿中的特定乾擾物質。

三、針對特定目標物的預處理方法如果血漿樣本的預處理是為了測定某個特定目標物(如弱鹼性藥物),則可能需要採用更為針對性的前處理方法。例如:1.使用三氯乙酸或高氯酸等沉澱血漿蛋白質,再取上清液進行後續處理。 2.調節pH值至弱鹼性以使目標藥物遊離出來,再加入有機溶劑進行萃取純化。

血漿樣本前處理是生物醫學研究、藥物分析及臨床診斷中不可或缺的一環。透過採用合適的前處理方法,我們能夠有效地去除或降低血漿中的干擾物質,保護並富集目標分析物,從而為後續的實驗分析提供高品質的樣本。

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