Flex应用专题 | 解锁蛋白质谱前处理自动化的无限潜能

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OT-2工作站的蛋白質定量測定

OT-2工作站在蛋白質定量測定中的應用,主要依託其高度自動化的移液、混合、孵育、洗滌等功能,以及與其他檢測設備的無縫集成,這種全方位的自動化能力,極大地促進了蛋白質定量測定流程的高效執行,確保了實驗結果的準確性與可重複性,為科學研究工作者提供了便利。

OT-2工作站的蛋白质定量测定

一、OT-2工作站的自動化操作流程1、樣品準備:將待測樣品進行必要的預處理,如裂解、離心等,以獲取蛋白質溶液。 2.程式編寫:使用Opentrons的軟體(如Opentrons App)撰寫自動化實驗程序,設定移液量、混合次數、孵育時間等參數。 3.自動化移液與混合:OT-2平台根據程序自動完成樣品的移液、試劑的添加和混合等操作,確保每個步驟的精確性和一致性。 4.孵育:將混合後的樣本置於溫控模組中,依照設定的溫度和時間進行孵育,使抗體與抗原充分結合。 5.洗滌:孵育結束後,OT-2平台自動進行洗滌步驟,去除未結合的試劑及雜質。 6.訊號檢測:將洗滌後的樣品轉移至檢測儀器(如分光光度計)中,檢測反應後的訊號強度。

二、結合蛋白質定量測定方法OT-2工作站支援多種蛋白質定量測定方法,如考馬斯亮藍法、紫外線分光光度法、BCA法、Folin-酚試劑法等。這些方法的化學原理各不相同,但都依賴蛋白質與特定試劑之間的反應來產生可檢測的訊號。 1.考馬斯亮藍法:考馬斯亮藍染料與蛋白質結合後,在特定波長下(如595nm)的吸光度與蛋白質含量成正比。 OT-2工作站可自動完成樣品的加樣、染色、洗滌及吸光度檢測等步驟。 2.紫外線分光光度法:蛋白質中的芳香性胺基酸(如酪胺酸、色胺酸)在紫外光下具有特徵吸收峰(如280nm)。 OT-2工作站可利用紫外線分光光度計檢測樣品在特定波長下的吸光度,進而計算出蛋白質含量。 3.BCA法:BCA(二喹啉甲酸)試劑在鹼性條件下與蛋白質中的銅離子反應,生成紫紅色的複合物。此複合物的吸光度與蛋白質含量成正比。 OT-2工作站可自動完成樣品的加樣、試劑添加、孵育及吸光度檢測等步驟。 4.Folin-酚試劑法:在鹼性條件下,Folin-酚試劑與蛋白質中的酪胺酸和色胺酸殘基反應,生成深藍色的鉬藍和鎢藍混合物。其吸光度與蛋白質含量成正比。 OT-2工作站同樣可自動化完成此方法的各個步驟。

三、OT-2工作站的優勢與特性1、高精度:OT-2平台採用高精度移液器,確保移液量的準確性,減少誤差。 2.高效率:自動化操作大大縮短了實驗週期,並提高了實驗效率。 3.高重複性:自動化流程減少了人為操作帶來的不確定性,提高了實驗結果的重複性。 4.彈性:OT-2平台可依實驗需求進行靈活配置,支援多種定量試劑盒及檢測方法。 5.節省成本:自動化操作減少了試劑和耗材的浪費,降低了實驗成本。

三、應用實例以美國哥本哈根大學健康科學學院諾和諾德基金會蛋白質研究中心的研究為例,他們使用Opentrons OT-2自動化移液平台設計了一種簡單而高效的蛋白質組學樣品製備工作流程,能夠在6小時內處理多達192個樣品。此工作流程透過完全自動化的方式整合了樣品消化、純化和Evotip裝載等環節,實現了高靈敏度的蛋白質定量測定。

OT-2工作站在蛋白質定量測定中的應用,充分發揮了其自動化、高精度、高效率和高重複性的優勢,為生物醫學研究、藥物研發、臨床診斷等領域提供了強有力的支持。隨著技術的不斷進步和應用的深入拓展,OT-2工作站將在更多領域展現出其獨特的價值和潛力。

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