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為了確保Opentrons Flex 核酸萃取工作站這項先進設備能夠持續且準確地運行,定期進行校準工作顯得格外重要。本文旨在深入探討Opentrons Flex 核酸萃取工作站的校準流程,詳細闡述從校準前的充分準備,到執行具體校準步驟的每一個細節,直至最終產生校準記錄和報告的全過程。
一、校準前準備1、確保環境條件:校準應在規定的環境溫度(10~30℃)和相對濕度(≤80%)下進行,同時確保環境中沒有明顯的機械振動和電磁幹擾。 2.準備校正工具:(1)超微量分光光度計:用於測量核酸濃度,以驗證萃取效率。 (2)振動測量儀:用於測量和校準工作站的振動頻率。 (3)溫濕度巡檢儀:用於監測和記錄環境溫度和濕度。 (4)電子天平:用於測量取液量的準確性。
二、校準步驟1、溫度校準:(1)使用溫度測量裝置,將溫度感測器固定在提取儀的加熱模組上,確保溫度感測器與加熱模組貼合緊密。 (2)依萃取儀的孔位數,均勻選取測溫點。例如,孔位數48位96位時選7個測溫點,8位48位時選5個測溫點,8位及以下時選3個測溫點。 (3)設定被校提取儀的校準溫度,穩定10分鐘或以上,待溫度穩定後,讀取測溫點的溫度值。 (4)計算溫度的示值誤差、均勻性和穩定性。 2.振動頻率校準:(1)選取振動頻率校準點,通常為提取儀頻率設定最大值的20%(低)、50%(中)、80%(高),或其他有實際需求的振動頻率。 (2)使用振動頻率測量裝置進行測量,待提取儀穩定5分鐘後,設定待測頻率值,分別測量低、中、高提取儀振動頻率的顯示值。 (3)每個頻率測量3次,計算振動頻率的顯示誤差和穩定性。 3.取液量校準:(1)分別設定萃取儀取液量為50μL、100μL、200μL,或其他有實際需要的取液量作為校準點。 (2)測量取液量的示值誤差、重複性和一致性。 (3)重複性測試時,選擇一個通道重複取液7次,以電子天平稱量所取液體質量,換算成體積後計算相對標準差。 (4)一致性測試時,以提取儀的多通道取液器取液一次,分別稱量各通道取液的質量,換算成體積後計算取液量的一致性。 4.核酸萃取回收率校正:(1)選擇有證核酸標準物質,以微量分光光度計測量其濃度,取3次測量的平均值作為核酸萃取前的初始濃度。 (2)以萃取儀對有證核酸標準物質進行核酸萃取。 (3)均勻選取測量點進行一致性考察,將每個孔中萃取好的核酸樣品溶液,分別以微量分光光度計測量其濃度。 (4)比較萃取前後的核酸濃度,計算萃取回收率及其一致性和重複性。
三、校準記錄和報告1、記錄校準數據:詳細記錄每一步校準的數據和結果,包括溫度、振動頻率、取液量和核酸提取回收率的測量值、計算值和誤差等。 2、產生校準報告:根據記錄的校準數據,產生校準報告,包括校準日期、校準人員、校準設備型號和編號、校準結果和結論等資訊。 3.評估校準結果:根據校準報告,評估萃取儀的性能是否符合使用要求。如不滿足,需進行必要的調整或維修。
Opentrons Flex 核酸萃取工作站的校準是一個系統且細緻的過程,它涵蓋了從校準前的準備到具體步驟的執行,再到校準記錄和報告的生成等多個環節。透過嚴格的校準流程,我們可以確保工作站的準確性和可靠性,為後續的核酸萃取實驗提供堅實的基礎。同時,定期的校準也是維持設備性能穩定、延長使用壽命的重要手段。
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