在OT-2上執行連續稀釋

摘要連續稀釋度是各種生物實驗的重要組成部分。例如，產生DNA、蛋白質或細胞培養的標準曲線需要以恆定的稀釋係數稀釋樣本的使用案例。在這裡，我們提出了一種替代執行這些重複步驟的手動移液。 opentronOT-2機器人可以在大約2分鐘內連續稀釋8個樣品，稀釋10次在複製之間具有很高的可靠性。的的係數所表示的精度每列的差異與更昂貴的液體處理平台相當。我們鼓勵使用者根據其特定的科學應用程式調整所附的參數化協議。

介紹連續稀釋既是獨立的實驗，也是更複雜的實驗管道的構件。應用可以是簡單地產生一個標準曲線或更複雜的表型來表徵跨細胞培養濃度。在任何應用中，都需要精確的移液才能產生可靠的結果。一般來說，人工實驗室工作可以在協議中的任何移液步驟中引入隨機錯誤。這些移液不準確可以包含不正確的稀釋因子sampIes.移液管的混合速度和尖端高度可以提高精度，但在手動移液的過程中，要保持不變卻具有挑戰性。此外，重複移液隨著時間的推移，重複移液會加重損傷。 OT-2是一種替代選擇以確保移液的可靠性和最終的連續稀釋實驗的數據品質。

材料-2液體處理機器人-2軟體版本3.1.2-光電管p300多通道移液管-視中心300µLTip機架-美國科學12-channeI自動化水庫（1061-8150）-康寧96井EIA/RIA易清洗tm透明平底聚苯乙烯（3368）-康寧500 mL分子生物學級水（46-000-CV）-麥考密克公司提供的各種食品顏色和雞蛋染料-藍色

• Tecan無限F200 pro

協議1.用50µL藍色食用染料和10 mL分子生物學級水製備藍色染料溶液。 2.將200µL的藍色染料溶液加入96-weIIlat底部釘劑的A1-H1的weIIs。 3.在槽式儲層的A1孔中加入20 mL稀釋劑。注意：最後一次稀釋後的欄位是空白區域的預設位置。槽/儲層的最後一口井是預設的液體垃圾。 4.根據圖1a的甲板佈局，在插槽1-3佈置實驗室餐具。 -插槽1=視中心300µLtip機架-槽2=12通道水庫

• SIot 3 = 96-weIIlat底部钉
  5.请将协议中的参数更改为以下参数：
  -稀释因子=为1.5
  -最终卷= 200
  -稀释次数= 10
  6.继续转到OT-2运行应用程序，上传您的协议并校准实验室软件。
  7.密封平板，并量化吸光度在450 nm，每针阅读器25睫毛。

結果圖1的frst6管柱的平均原始吸光度值如圖2所示。每一列顯示比前一列稀釋1.5倍。變異數的一致性（CV%）說明了在重複之間的高可靠性。表1顯示了每個稀釋板的柱狀CV%。每個柱的平均精度約為2%，與使用比OT-2昂貴得多的液體處理器進行的類似實驗的值相當1.每個連續稀釋板在大約2分鐘內在OT-2上完成。

結論在這裡，我們提出了一個簡單的連續稀釋實驗，說明了OT-2液體處理機器人的高精度移液。除了精度外，OT-2還能夠進行高度可客製化的移液技術。使用者可以優化抽吸/分配速度，混合速度，空氣間隙和許多其他選項，以更準確和更有效的液體處理。自動連續稀釋將為科學家提供可靠的移液系統，以及寶貴的步行時間，從繁瑣、容易出錯的手工工作。