移液器白皮書：熱循環模組

Opentrons 熱循環模組 GEN2 可為您的實驗提供精確且均勻的擴增溫度同時維持較低的蒸發率。

產品說明

Opentrons  熱循環模組是放置在甲板上的全自動化 的熱循環儀器，提供了一個96孔板式的全自動 PCR 功能。 熱循環模組與所有的 Opentrons 儀器和軟體相容，所以 可以在 Opentrons  儀器上實現全自動化的 PCR 前處理和PCR 流程。

Opentrons 熱循環模組的孔板上配有自動加熱蓋和可更 換的密封元件，以確保有效的加熱樣品的同時把樣品蒸發< /strong> 量降到最低。在熱循環完成後，透過孔板上升裝置使孔板塊 上升，然後可以手動或使用機械轉板抓手將 PCR 孔板 移出。排氣口將熱循環儀中的熱空氣排出，並將其導向遠離機器甲板的地方。

效能資料

Opentrons對熱循環模組 GEN2  進行了一系列嚴格的性能測試，以確保儀器品質遵守業界標準的性能規範

表 1：在穩定狀態下溫度的準確度與一致性

溫度升降速率(變溫率)

對8個不同的儀器在加熱(到99℃)和冷卻(到4℃)期間測量其平均最大溫度升降速率。每個定點的保持時間為5分鐘。熱循環儀的最大平均變溫率為4 .45℃/s

效能資料

透過用可重複使用的密封元件，多種反應體系，96孔 PCR板，對儀器的擴增一致性進行了測試。使用Lambda 引子擴增Lambda DNA,熱循環參數如下： 在94℃孵育10分鐘，25個循環，每個循環分別在94℃ 擴增15秒和在70 ℃擴增1分鐘，並在72 ℃下延伸7 分鐘。透過使用讀扳機捕獲原始螢光值對每個孔槽的擴增增量進行了測量。透過計算得出變異係數 (CV%) 見表2。數據表明，密封圈可以重複使用多達25次，且不會降低性能。在10 μL 和 100μL 反應體積下，CV值均保持較低。此外，使用 OT-2的 96孔PCR 板，在10uL 到100uL 這個較大的範圍區間內，熱循環模組都具有較好的擴增重複性。

低蒸發率

對 5 0 個不同的熱循環模組的蒸發率進行了評估，在 PCR 96孔板中樣本的體積分別為10μL,20μL,50μL  和100 μL。在 PCR 運行3步前後分別測量了樣本的體積重量；包 括35次循環，每次循環的設定溫度和保持時間為：94℃(10 s)、70 ℃(30s)和72℃(30s) 。

所有測試樣品體積的平均蒸發率均<6%,最大樣品體積(100μL)平均蒸發率均<1%。

數據表明，Opentrons    熱循環模組 GEN2 有著一致且可靠的擴增功能，且最小樣本體積損失低至僅10 μL。此模型展示了溫度快速 升降速率和在各種不同的設定點對溫度的穩定保持能力。在重複使用一次性密封圈，使用多種反應體積，和無論是否在機製備樣品的情況下，96 孔板的擴增均被證明是一致均勻的。 Opentrons  熱循環儀 GEN2  的 9 6 孔 位 PCR 透過各種測試證明其提供了可重複且準確的擴增結果，以確保實驗室日常實驗的一致性。

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