PCR 반응 액체 조성 및 처리

분자 생물학 분야에서, PCR (중합 효소 연쇄 반응)은 강력한 기술 도구이며 DNA의 증폭 및 검출에 널리 사용됩니다. 이 기술 프로세스의 핵심 캐리어로서, PCR 반응 솔루션의 정확성과 과학적 특성은 PCR 실험의 성공 또는 실패와 직접 관련이있다. 오늘날, 우리는 PCR 반응 유체의 주요 성분을 깊이 탐구하여, 이러한 주요 요소가 PCR 반응에서 어떻게 협력하여 DNA의 정확한 증폭을 촉진 하는지를 밝혀냅니다.

1. PCR 반응 용액의 주요 성분 1. 주형 DNA 기능 : 증폭 할 표적 서열을 함유하는 PCR 증폭의 시작 물질. 요구 사항 : 단일 가닥 또는 이중 가닥 DNA 일 수 있지만 특정 순도와 무결성을 보장해야합니다. 임상 시험 시편의 경우, 빠르고 쉬운 방법은 종종 핵산을 템플릿으로 추출하는 데 사용됩니다. 2. 특정 프라이머 작용 : 인공적으로 합성 된 올리고 뉴클레오티드 단편은 주형 DNA에서 표적 서열을 구체적으로 인식하고 결합하여 DNA 폴리머 라제를 안내하여 가닥을 연장시킨다. 설계 원리 : 길이는 일반적으로 15-30베이스이며 일반적으로 약 20bp입니다. G+C 함량은 40-60%이며, 퓨린 또는 피리 미딘의 지속적인 배열을 피하기 위해. 프라이머 이량 체의 형성을 방지하기 위해 내부 2 차 구조와 프라이머, 특히 3 '엔드 사이의 보완을 피하십시오. 3 '엔드베이스는 증폭 효율을 향상시키기 위해 엄격하게 짝을 이루어야합니다. 3. 열 내성 DNA 폴리머 라제 (예 : TAQ DNA 폴리머 라제)의 역할 : PCR 반응에서 DNA 가닥의 연장을 촉매한다. 특징 : 열 안정성이 높고 PCR의 고온 변성 조건에서 활동을 유지할 수 있습니다. 복용량 : 일반 반응 시스템에 첨가 된 효소의 양은 실험 조건과 효소의 활성에 따라 조정해야합니다. 4. 4 가지 유형의 DNTP (Deoxynucleoside Triphosphate) 기능 : DNA 합성을위한 원료로서, DNA 폴리머 라제의 촉매하에 새로 합성 된 DNA 가닥에 통합된다. 농도 : 일반적으로 사용되는 농도는 50-200μm이며, 4 가지 유형의 DNTP의 농도는 PCR 반응의 균형과 효율을 보장하기 위해 동일해야합니다. 5. PCR 반응 완충 기능 : 필요한 보조 인자 (예 : Mg^2+)뿐만 아니라 PCR 반응에 필요한 pH 값 및 이온 성 환경을 제공합니다. 특징 : Mg^2+의 농도는 PCR 반응의 특이성 및 수율에 상당한 영향을 미치며 실험 조건에 따라 최적화되어야합니다.

2. OPENTRONS OT-2 PCR 반응 유체를 처리하기위한 자동화 된 피펫 팅 로봇 1. 코어 기능 : OT-2는 하드웨어 모듈성, 유연성 및 사용자 정의 특성을 갖춘 데스크탑 레벨 자동화 피펫 팅 플랫폼이며 많은 일반적인 응용 프로그램의 자동화를 실현할 수 있습니다. PCR 반응 액체를 디버깅 할 때, OT-2는 템플릿 DNA, 프라이머, DNTP, 완충 용액 및 MG^2+등과 같은 다양한 반응 성분을 정확하게 분배하고 혼합하여 PCR 반응 액체의 정확성 및 일관성을 보장 할 수있다. 2. 파이프 라인 정확도 : OT-2가 액체의 1UL을 흡수 할 때 정확도 CV 값은 ± 5%이며, 이는 시장에서 10 배 더 비싼 피펫 팅 장비와 비슷합니다. 따라서, PCR 반응 액체를 디버깅 할 때, OT-2는 각 성분의 정확한 분포를 보장하고 인공 오차를 줄일 수 있습니다. 3. 모듈 식 설계 : OT-2 보드의 모듈 식 설계를 통해 사용자는 온도 제어 모듈, 자기 비드 정제 모듈 등과 같은 요구에 따라 다양한 기능 모듈을 자유롭게 결합 할 수 있습니다. PCR 반응 액체를 디버깅 할 때, 사용자는 반응 온도를 제어하기 위해 필요에 따라 온도 제어 모듈을 설치하여 올바른 온도 조건 하에서 PCR 반응이 수행되도록 할 수 있습니다. 4. 온도 제어 모듈 : 온도 제어 모듈은 반응 시스템의 온도를 정확하게 제어하는 ​​데 사용되는 OT-2 용 Opentrons가 특별히 설계된 기능 모듈 중 하나입니다. PCR 반응에서, PCR 반응은 특정 온도 조건 하에서 3 단계의 변성, 어닐링 및 연장이 필요하기 때문에 온도 제어가 중요하다. 온도 제어 모듈은 이러한 단계가 올바른 온도 범위 내에서 수행되도록하여 PCR 반응의 성공률 및 제품 품질을 보장합니다.

PCR 반응 유체를 디버깅 할 때 Opentrons는 주로 자동화 된 로봇 OT-2와 온도 제어 모듈 및 기타 기능 모듈을 지원합니다. 이들 장치는 PCR 반응 유체의 정확한 준비 및 PCR 반응의 성공적인 진행을 보장하기 위해 함께 작동한다.

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