Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 PCR 반응

Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 작업 원리는 분자 생물학 기술인 PCR (중합 효소 연쇄 반응)의 핵심 원리에 깊이 뿌리 박혀 있으며 자동화 실험실 장비 연구 및 개발 분야에서 Opentrons의 최첨단 기술과 혁신적인 성과를 영리하게 통합합니다. 고도로 통합 된 자동화 시스템을 통해 워크 스테이션은 본질적으로 DNA의 복제 프로세스를 정확하게 시뮬레이션 할뿐만 아니라 실험의 정확성, 반복성 및 효율성을 크게 향상시킵니다.

PCR 반응 조건은 온도, 시간 및 사이클 시간을 포함한다. 이러한 조건의 선택 및 최적화는 PCR 반응의 성공에 중요하다. 1. 온도 변성 온도 : 일반적으로 90-95 ℃로, 템플릿 DNA를 단일 가닥으로 완전히 변성하는 데 사용됩니다. 어닐링 온도 : 프라이머의 TM 값, 일반적으로 40-60 ° C에 기초하여 결정되며, 이는 프라이머를 주형 DNA에 결합하는 데 사용됩니다. 연장 온도 : 일반적으로 70-75 ℃에서, DNA 가닥 연장은 Taq DNA 폴리머 라제의 작용하에 수행된다. 2. 시간 변성 시간 : 일반적으로 1 분과 같은 짧은 주형 DNA를 완전히 변성하기에 충분합니다. 어닐링 시간 : 일반적으로 30-60 초, 프라이머를 주형 DNA에 완전히 결합하기에 충분합니다. 연장 시간 : 증폭 될 단편의 길이에 따라 일반적으로 1-15 분. 3. 사이클 수는 일반적으로 25-35 일수록 증폭 생성물이 클수록 비특이적 인 제품의 생산을 증가시킬 수 있습니다.

2. 준비 단계 1. 설계 프라이머 : 프라이머가 주형 DNA에 효율적으로 결합하고 증폭을위한 DNA 폴리머 라제에 효율적으로 결합 할 수 있도록 표적 DNA 서열에 따른 설계 특정 프라이머. 2. 템플릿 DNA 준비 : 템플릿 DNA의 순도와 농도가 PCR 반응의 요구 사항을 충족하도록하십시오. 주형 DNA는 생물학적 샘플로부터 추출 될 수 있거나 다른 공급원으로부터 DNA 조각 일 수있다. 3. 반응 시스템 준비 : PCR 반응의 요구 사항에 따라, 혼합 주형 DNA, 프라이머, DNTP (Deoxynucleoside Triphosphate), 완충액, MGCL2 (필요한 경우), DNA 폴리머 라제 등을 특정 비례하여 PCR 반응 시스템을 형성합니다. 이 단계는 외래 DNA의 간섭을 방지하기 위해 핵산이없는 환경에서 수행되어야합니다. 4. 샘플로드 : 준비된 PCR 반응 시스템을 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 지정된 위치, 일반적으로 PCR 보드 또는 PCR 튜브에로드하십시오. 반응 시스템 부피 및 조성이 각 웰 또는 튜브에서 일관성이 있는지 확인하십시오.

3. 프로그램 설정 1. 장치 연결 : Opentrons Flex PCR 워크 스테이션을 컴퓨터 또는 기타 제어 장치에 연결하여 장치가 정상적으로 통신 할 수 있는지 확인하십시오. 2. 소프트웨어 시작 : Opentrons에서 제공 한 제어 소프트웨어 또는 인터페이스를 열고 PCR 반응 프로그램을 설정할 준비를합니다. 3. 새로운 PCR 프로그램 만들기 : 소프트웨어에서 새로운 PCR 프로그램을 만들고 변성, 어닐링 및 확장을 포함한 온도, 시간 및주기 시간과 같은 매개 변수를 설정하십시오. 이들 파라미터는 표적 DNA 서열의 특성 및 사용 된 프라이머를 기반으로 설정해야한다. Opentrons Flex PCR 워크 스테이션은 일반적으로 실험 요구 사항에 맞게 사용자 정의 할 수있는 유연한 프로그래밍 기능을 지원합니다. 4. 프로그램 저장 및 업로드 : SET PCR 프로그램을 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션에 저장하고 업로드하십시오. 프로그램이 올바른지 확인한 후 PCR 반응을 수행 할 준비를하십시오.

4. PCR 반응을 수행합니다. 1. 반응 시작 : 소프트웨어 인터페이스에서 "시작"또는 유사한 버튼을 클릭하여 PCR 반응을 시작하십시오. Opentrons Flex PCR 워크 스테이션은 사전 설정 절차에 따라 온도 제어 및 사이클 작업을 자동으로 수행합니다. 2. 반응 모니터링 : 반응 과정에서 반응 상태와 진행 상황을 소프트웨어 인터페이스를 통해 실시간으로 모니터링 할 수 있습니다. Opentrons Flex PCR 워크 스테이션에는 일반적으로 온도 곡선 및 사이클과 같은 주요 정보를 실시간으로 표시 할 수있는 강력한 모니터링 기능이 있습니다. 3. 종말 반응 : PCR 반응이 사전 설정된 사이클 수에 도달하면 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션은 자동으로 반응을 중지합니다. 이때, 후속 분석을 위해 PCR 플레이트 또는 PCR 튜브를 제거 할 수 있습니다.

5. 후속 처리 1. PCR 생성물의 분석 : 아가 로스 겔 전기 영동 또는 기타 적절한 방법에 의한 PCR 생성물의 특이성 및 수율 분석. 증폭 된 제품이 예상 크기와 수량을 충족하는지 확인하십시오. 2. 데이터 기록 및 콜레이션 : PCR 반응의 결과와 데이터를 기록하고 필요한 협업 및 분석을 수행하십시오. 이 데이터는 후속 실험 검증 또는 과학 연구에 사용될 수 있습니다. 3. 청소 및 유지 보수 : PCR 반응을 완료 한 후 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션 및 관련 장비를 적시에 청소하여 오염 및 손상을 방지하십시오. 동시에 장비의 성능과 상태를 정기적으로 확인하여 장비가 오랫동안 안정적으로 작동 할 수 있는지 확인하십시오.

위의 단계는 일반적인 PCR 반응 원리 및 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 기능적 특성을 기반으로하는 일반 가이드입니다. 특정 작업은 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 사용자 설명서를 참조하거나 Opentrons 기술 지원 팀에 문의하여 정확한 지침을 참조하십시오.

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