NGS (차세대 시퀀싱) 기술은 오늘날 생명 과학 분야에서 가장 중요한 도구 중 하나가되었습니다. 유전체학의 빠른 발달로 인해 NGS 검출의 원리는 과학 연구자들이 유전자 서열의 복잡성을 드러내는 데 도움이 될뿐만 아니라 임상 진단 및 정밀 의학과 같은 많은 분야에서 중요한 응용을 달성했습니다.
1. 기본 원리 NGS 기술의 기본 원리는베이스가 DNA 가닥에 삽입 될 때베이스가 DNA 가닥에 삽입 될 때 일부 화학 마커에 의해 전송 된 신호를 사용하여 서열 정보를 읽는 것입니다. 이 신호는 광학 신호 또는 H+ 스트림 신호 일 수 있습니다. 이들 신호를 캡처하고 분석함으로써, DNA 서열을 결정할 수있다.
2. 기술 플랫폼 및 방법 NGS는 합성, 결찰 시퀀싱 등 시퀀싱과 같은 다양한 기술 플랫폼을 기반으로합니다. 다음은 합성 및 시퀀싱의 예입니다. 동시에 시퀀싱 :이 방법은 DNA 폴리머 라제의 작용하에 형광 표지 된 뉴클레오티드를 첨가하여 시퀀싱됩니다. 시퀀싱 공정 동안, DNA 주형 가닥이 프라이머에 결합 한 후, 상이한 형광 라벨을 갖는 4 개의 데 옥시 뉴클레오티드 (DATP, DTTP, DCTP, DGTP)가 DNA 폴리머 라제의 촉매하에 서열에 첨가된다. 뉴클레오티드가 연장 된 DNA 가닥에 첨가 될 때마다, 특정 형광 신호가 방출된다. 이들 형광 신호를 캡처하고 분석함으로써, 첨가 된 뉴클레오티드의 종을 측정하여 DNA의 서열을 유추 할 수있다.
3. 시퀀싱 프로세스 및 단계 NGS 검출은 일반적으로 다음 단계를 포함합니다. 1. DNA 추출 : 시퀀싱을위한 템플릿으로서 샘플에서 고품질 DNA를 추출합니다. 2. 라이브러리 준비 : 추출 된 DNA를 조각화하고 양쪽 끝에 특정 링커 시퀀스를 추가하여 시퀀싱 라이브러리를 형성합니다. 3. 대동맥 시퀀싱 : 고 처리량 병렬 시퀀싱을 위해 제조 된 시퀀싱 라이브러리를 시퀀서에로드합니다. 시퀀서는 각각의 DNA 단편에 의해 방출 된 형광 신호를 캡처하고 분석하여 서열을 결정한다. 4. 데이터 분석 : 저품질 서열 제거, 기준 게놈에 정렬, 변이 변이체 등을 포함하여 시퀀싱에서 얻은 많은 양의 원본 데이터를 프로세스 및 분석하고 마지막으로 신뢰할 수있는 시퀀싱 결과를 얻습니다.
4. 기술적 특성 및 장점 1. NGS 기술은 수십만에서 수백만에서 수백만 개의 DNA 분자의 서열 측정을 수행하여 시퀀싱의 처리량 및 효율을 크게 향상시킬 수 있습니다. 2. 높은 깊이 : NGS는 높은 깊이 시퀀싱, 표적 영역의 반복 시퀀싱 또는 전체 게놈을 여러 번 달성 할 수 있으며, 저주파 변화를보다 정확하게 감지 할 수 있습니다. 3. 높은 감도 : NGS 기술은 매우 낮은 농도의 DNA 분자를 감지 할 수 있으며 미량 샘플의 시퀀싱에 적합합니다. 4. 풍부한 정보 : NGS 기술은 많은 양의 서열 정보를 제공하여 새로운 유전자 돌연변이 및 질병 관련 부위를 발견하는 데 도움이됩니다.
NGS 검출 원리는 DNA 합성 동안 방출 된 형광 신호를 캡처하고 분석함으로써 DNA 서열을 결정하기 위해 고 처리량 병렬 시퀀싱 기술을 기반으로한다. 이 기술은 높은 처리량, 높은 깊이, 높은 감도 및 풍부한 정보의 특성을 가지고 있으며 임상 진단, 과학 연구 및 기타 분야에서 광범위한 응용 전망을 보유하고 있습니다.
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