ELISA 테스트의 유형 및 다이어그램

Elisa는 원래 스웨덴의 스톡홀름 대학교의 Eva Engvall과 Peter Perlman과 네덜란드의 Anton Schuurs와 Bauke van Weemen에 의해 독립적으로 고안되었습니다. 그들은 방사성 면역 분석법이 잠재적으로 위험한 방사성 표지 된 항원 또는 항체를 사용했기 때문에 방사선 면역 분석 대신 항원 또는 항체의 존재를 결정할 수있는 면역 분석을 찾았으므로 효소 기반 대안을 설계했기 때문입니다.

ELISA 테스트 유형

이제 4 가지 주요 ELISA 유형, 직접 방법, 간접 방법, 샌드위치 방법 및 경쟁 방법이 있습니다. 다음과 같은 그림은 항원의 결정을 보여줍니다.

ELISA 직접 방법 ELISA 직접 방법에서, 샘플의 항원 또는 항체는 비특이적 방식으로 코팅 된 플레이트에 직접 흡착된다. 이어서, 특이 적 분석 항체 또는 항원을 웰로 결찰시킨다. 그런 다음 분석 기판을 사용하여 측정 가능한 색상 변화를 생성하고 플레이트 리더에서 정량화합니다. 이 검출 방법은 단계가 적고 속도가 빠르며 다른 ELISA 방법보다 오류를 도입 할 가능성이 적기 때문입니다. 그러나 흡착 단계는 비특이적이므로 배경 노이즈가 높을 수 있습니다. 이차 항체 단계의 부재는 신호 증폭을 의미하지 않아 검출 감도를 감소시킨다. 또한 각각의 원하는 표적에 대해 공액 분석 항체/항원의 생성이 필요하다.

ELISA 간접 방법 ELISA 간접 방법 또는 IELISA는 원래 인간 혈청 알부민을 감지하기 위해 원래 개발되었습니다. 이것은 테스트 신호를 증폭시키고 ELISA 직접 방법의 한계를 극복합니다. 또한 접합 된 이차 항체는 1 차 항체에 특이적인 종일 필요 때문이다. 총 샘플 항원이 코팅 된 플레이트에 결합 된 경우 ELISA 직접 방법과 마찬가지로 배경 노이즈는 여전히 문제가됩니다. 그러나, 분석 방법이 샘플 항체를 검출하는데 사용되는 경우, 정제 된 표적 항원은 플레이트 상에 코팅되고 1 차 항체는 샘플로부터 유래된다. 이것은 배경 노이즈를 크게 감소 시키므로 이러한 분석은 샘플에서 항체 역가를 결정하는 데 가장 인기가 있습니다. ELISA 간접적 방법의 단점에는 더 긴 요법 시간, 오류에 대한 기회가 더 많으며 2 차 항체와 교차 반응 할 가능성이 포함됩니다.

엘리사 샌드위치 방법 에 따르면, ELISA 샌드위치 방법은 항체 사이의 항원을 1977 년에 개발할 수 있으며, 위에서 설명한 ELISA 샌드위치 방법은 비정상적인 결합에 대한 구체적인 결합에 기초한다. 이 조합은 검출의 감도와 특이성을 더욱 향상시킵니다. 그러나, 그들은 효과적으로 기능하기 위해 호환 가능한 포획 및 분석 항체 쌍을 결정해야하며, 교차 반응에 문제가있을 수있다. 이 탐지 방법은 일반적으로 가장 많은 단계를 가지고있어 오류 가능성이 높아집니다. 항원 결합 단계의 선택성으로 인해, ELISA 샌드위치 방법은 항원이 복잡한 혼합 상태에있을 때 특히 유용합니다. 항원을 정제 할 필요가 없기 때문입니다.

ELISA 경쟁법 ELISA 억제 방법 또는 ELISA 차단 방법으로도 알려진 ELISA 경쟁법은 ELISA 기술 중 가장 복잡한 것일 수 있습니다. 1976 년에 인간 융모 성 생식선 자극 호르핀을 감지하기 위해 원래 개발 된 검출 방법은 예상 출력 신호 수준에 대한 간섭을 감지함으로써 역 관계를 만듭니다. 샘플에 적용되는 표적이 많을수록 측정 된 출력 신호가 낮아집니다. 다른 ELISA 방법도 경쟁 방법으로 변경할 수도 있습니다. 여기에는 두 가지 일반적인 원리가 있습니다 : 샘플 항원 또는 항체는 각각 기준과 경쟁하고, 제한된 수의 표지 된 항체 또는 항원에 결합하여, 샘플 항원 또는 항체는 각각 표지 된 기준과 경쟁 할 수 있으며, 제한된 수의 항체 또는 항원에 결합 할 수있다. ELISA 경쟁법은 그것이 취하는 형태와 마찬가지로 동일한 장점과 단점을 가지고 있습니다. 그러나, 항원이 더 작을 때의 효과가 강조되며, 2 개의 항체가 동시에 결합하는 능력 (ELISA 샌드위치 방법에 따라) 또는 하나의 항체만을 수용 할 수있는 능력을 제한한다.

ELISA 테스트의 유형에는 고유 한 특성이 있으며 올바른 테스트 방법을 선택하는 것이 실험 결과의 정확성을 보장하는 핵심입니다. 직접 Elisa, 간접 Elisa, Sandwich Elisa 또는 경쟁력있는 Elisa이든, 모두 고유 한 응용 프로그램 시나리오와 장점이 있습니다. 실제로, 연구원들은 샘플 유형, 실험 목표 및 필요한 민감도와 같은 요소를 기반으로 선택해야합니다. 생명 공학의 발전으로 ELISA 기술은 지속적으로 개선하여 의료 분야, 과학 연구 및 공공 안전 분야에 대한 강력한 지원을 제공합니다.

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