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DNA 시퀀싱 기술은 현대 생물학적 연구에서 중요한 도구입니다. 이 기술을 통해 과학자들은 게놈 구조, 기능 및 변형에 대한 심층적 인 이해를 얻을 수 있으며 의학, 농업 및 환경 과학과 같은 분야에 대한 중요한 데이터 지원을 제공 할 수 있습니다.
1. 기본 원리 DNA 시퀀싱 기술의 기본 원리는 DNA 폴리머 라제를 사용하여 가닥으로 종료 된 뉴클레오티드가 혼입 될 때까지 결정될 서열의 주형으로 결합 된 프라이머를 확장하는 것입니다. 각각의 서열 분석은 4 개의 개별 반응 세트로 구성되며, 각각 4 개의 데 옥시 뉴클레오티드 트리 포스페이트 (DNTP)를 모두 함유하고, 제한된 양의 상이한 dideoxynucleoside 트리 포스페이트 (DDNTP)와 혼합된다. 연장에 필요한 3-OH 그룹의 부족으로 인해, 길쭉한 올리고 뉴클레오티드는 G, A, T 또는 C에서 선택적으로 종료됩니다. 정지 점은 반응에서 상응하는 dideoxy에 의해 결정되어 DNA 서열을 얻는다.
2. 주요 방법 1. Sanger Dideoxy chain 종료 종결 방법 : 이것은 가장 초기의 가장 널리 사용되는 시퀀싱 방법 중 하나입니다. 이 방법은 DNA 폴리머 라제를 사용하여 DNA 가닥을 합성하고, DDNTP (dodeoxynucleotides)를 발견하면 가닥 합성이 종결됩니다. 4 개의 상이한 DDNTP를 각각 A, T, C 및 G의 4 개의 염기에서 종결시켜 각각 상이한 길이의 일련의 DNA 단편을 형성 하였다. 이들 단편이 전기 영동에 의해 분리 된 후, DNA 서열을 읽을 수있다. 2. 화학 분해 방법 :이 방법은 Maxam과 Gilbert에 의해 발명되었지만 Sanger 방법과는 다른 원리가 있지만 DNA 시퀀싱도 실현할 수 있습니다. 특정 화학 물질을 사용하여 특정 염기에서 DNA 가닥을 파괴하여 다른 길이의 일련의 DNA 단편을 형성합니다. 이 단편은 또한 전기 영동에 의해 분리되며 DNA 서열을 읽을 수있다. 3. 새로운 세대 시퀀싱 기술 : 고 처리량 시퀀싱, 단일 분자 시퀀싱 및 기타 기술 포함. 이러한 기술은 빠른 시퀀싱 속도, 저비용 및 높은 정확도의 장점을 가지고 있습니다. 그들은 고급 시퀀싱 플랫폼과 알고리즘을 사용하여 많은 DNA 단편을 동시에 시퀀싱하여 시퀀싱 효율을 크게 향상시킵니다.
3. 시퀀싱 공정 1. DNA 시퀀싱 기술의 일반적인 과정은 DNA 추출, DNA 단편화, DNA 라이브러리 구성, DNA 증폭, 시퀀싱 및 시퀀싱 결과 분석을 포함한다. 2. DNA 추출 : DNA는 생화학 적 방법에 의해 세포 또는 조직으로부터 분리되고 정제된다. 3. DNA 단편화 : 후속 시퀀싱 반응을 위해 장쇄 DNA를 짧은 조각으로 끊습니다. 4. DNA 라이브러리 구성 : 단편화 된 DNA는 특별히 처리되어 고 처리량 시퀀싱을위한 시퀀싱 라이브러리로 구성됩니다. 5. DNA 증폭 : PCR 및 기타 기술을 통해 DNA를 증폭시켜 시퀀싱을위한 DNA의 양을 증가시킨다. 6. 시퀀싱 : 시퀀싱 기기를 사용하여 증폭 된 DNA를 시퀀싱하여 원래 시퀀싱 데이터를 얻습니다. 7. 시퀀싱 결과 분석 : 시퀀싱 데이터는 최종 DNA 서열 정보를 얻기 위해 생물 정보학 방법을 사용하여 처리되고 분석된다.
4. 응용 분야 DNA 시퀀싱 기술은 많은 분야에서 광범위한 적용 값을 가지고 있습니다. 1. 기본 과학 연구 : 유전자의 구조와 기능, 게놈의 조성 및 진화 등을 연구하는 데 사용됩니다. 2. 의료 분야 : 유전 질환 진단, 개인화 된 의료 계획의 제형, 약물 연구 및 개발 등 3. 법의학 : 범죄 현장에서 증거 분석, 신원 식별 등에 사용. 4. 농업 분야 : 작물 품종 개선, 유전자 다양성 보호 등
기술의 지속적인 개발로 인해 DNA 시퀀싱 기술은 더 높은 처리량, 저렴한 비용 및 높은 정확도로 발전하고 있습니다. 동시에, 시퀀싱 데이터의 처리 및 분석 방법도 지속적으로 개선하여 DNA 시퀀싱 기술의 광범위한 적용을 강력하게 지원합니다. 앞으로 DNA 시퀀싱 기술은 더 많은 분야에서 중요한 역할을 수행하고 인간 사회의 발전에 더 큰 기여를 할 것으로 예상됩니다.
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