Opentrons Flex PCR 워크 스테이션에 대한 PCR 증폭 공정

광대 한 생물학적 과학 분야에서, 중합 효소 연쇄 반응 (PCR)은 항상 분자 생물학 실험을위한 중요한 도구였다. 이 기술은 추적 DNA 샘플을 신속하게 복제하여 후속 연구를위한 견고한 토대를 제공 할 수 있습니다. 고급 로봇 기술과 정확한 온도 제어 시스템을 결합한 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션은 PCR 증폭을보다 안정적이고 신뢰할 수있게합니다. 초보자이든 경험이 풍부한 과학 연구원이든,이 플랫폼은 효율적이고 정확한 PCR 증폭을 쉽게 달성하는 데 도움이됩니다.

opentrons flex PCR Workstation

1. 실험 준비 단계 1. 설계 프라이머 : 전문 프라이머 설계 소프트웨어를 사용하여 대상 DNA 서열을 기반으로 적절한 프라이머 쌍을 설계합니다. 프라이머 설계는 특이성, 길이, GC 함량 및 어닐링 온도를 고려해야합니다. 2. 템플릿 DNA 준비 : 필요한 DNA 템플릿을 추출하고 그 농도와 순도를 결정하십시오. 주형 DNA의 농도와 순도가 PCR 반응의 요구 사항을 충족하는지 확인하십시오. 3. PCR 반응 시스템 준비 : 실험 요건에 따라, DNA 템플릿, 프라이머, DNTP (Deoxynucleoside Triphosphate), PCR 완충액, MGCL (필요한 경우), TAQ DNA 폴리머 라제 등을 포함한 PCR 반응 혼합물을 준비하십시오. 모든 성분을 특정 비율로 균등하게 섞어 PCR 튜브에 분취하십시오.

2. 샘플 로딩 및 기기 설정 단계 1. Opentrons Flex PCR 워크 스테이션 예열 : 워크 스테이션을 열고 실험 요구에 따라 예열 온도를 설정하십시오. 2. 샘플을로드하십시오 : 제조 된 PCR 반응 혼합물을 PCR 튜브에 추가하십시오. Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 샘플 홀더에 PCR 튜브를 놓습니다. 3. PCR 사이클 파라미터 설정 : 워크 스테이션의 제어 인터페이스에서, 변성 온도 및 시간, 어닐링 및 확장 시간, 사이클 수를 포함한 PCR 증폭의 사이클 파라미터를 설정하십시오. 매개 변수 설정은 특정 실험 요구 사항과 표적 DNA 서열의 특성에 따라 최적화되어야합니다.

3. PCR 증폭 단계 1. 변성 단계 : 반응기를 약 93-98 ° C로 가열하고, 특정 기간 (예 : 20-30 초) 동안 유지하고 DNA를 단일 가닥으로 분리하십시오. 2. 어닐링 단계 : 온도를 약 50-65 ° C로 줄이고 일정 기간 (예 : 20-40 초)을 고정시켜 프라이머 쌍과 주형 DNA 단일 가닥의 상보 시퀀스를 유지하십시오. 3. 연장 단계 : DNA 폴리머 라제의 최적 온도 (보통 72 ° C)로 온도를 증가시키고, DNA 폴리머 라제가 원료로서 DNTP를 사용하여 새로운 DNA 가닥을 합성하도록 특정 기간 동안 (표적 DNA 단편의 길이 및 DNA 폴리머 라제의 능력에 따라) 일정 기간 동안 유지합니다. 4. 순환 증폭 : 상기 변성, 어닐링 및 확장 단계를 반복하여 PCR 증폭의 사이클을 형성합니다. 일반적으로 PCR 공정은 25-35 사이클을 사용하며 각 사이클은 한 번이면 표적 DNA 단편의 수가 두 배가됩니다.

4. 증폭 종료 및 결과 분석 단계 1. 최종 확장 : 모든 사이클 후에는 모든 미완성 된 DNA 가닥이 완전히 확장되도록 추가 연장 단계가 72 ° C에서 수행됩니다. 2. 샘플을 냉각시키고 꺼내면 증폭이 완료된 후 Opentrons Flex PCR 워크 스테이션은 자동으로 4 ° C로 냉각되어 샘플을 제거 할 수 있습니다. 3. 결과 분석 : PCR 생성물은 겔 전기 영동, 실시간 형광 정량적 PCR 및 기타 방법으로 분석되었다. 전기 영동 맵에서 DNA 밴드를 관찰하여 PCR 증폭이 성공했는지 여부와 증폭 생성물의 특이성 및 농도를 결정하십시오.

5. 실험 후 처리 및 기기 유지 보수 단계 1. 작업 영역 청소 : 실험이 완료된 후 작업 영역을 정리하여 교차 오염을 피하십시오. 2. 데이터 기록 : 후속 실험에 대한 참조를 제공하기 위해 증폭 곡선, 전기 영동 다이어그램 등을 포함한 실험 결과를 기록합니다. 3. 계측기 유지 보수 : Opentrons의 정기적 인 유지 보수 및 보정 PCR 워크 스테이션을 통해 기기의 정확성과 안정성을 보장합니다.

Opentrons Flex PCR 워크 스테이션의 PCR 증폭 공정에는 실험 준비, 샘플 로딩 및 기기 설정, PCR 증폭, 증폭 종료 및 결과 분석, 실험 후 처리 및 기기 유지 보수와 같은 여러 단계가 포함됩니다. 각 단계는 PCR 증폭의 정확성과 신뢰성을 보장하기 위해 신중한 작동이 필요합니다.

관련 읽기 권장 사항

opentrons New York ISO 9001 인증서

Covid-19 전염병이 생명 과학을 완전히 변화시킨 방법

피펫 백서 : Hepa 모듈

배양 매체 준비를위한 완전 자동 피펫 워크 스테이션의 장점

OT-2 Nucleic Acid Extraction Workstation의 팁 사양

opentrons flex ngs 라이브러리 준비 워크 스테이션 기능