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생물 의학 연구 분야에서, 생물학적 활성 분자의 중요한 부류로서, 폴리펩티드의 순도와 품질은 약물 연구 개발 및 치료 효과에 중요하다. 그러나, 펩티드 합성 동안 생성 된 무기 염 및 기타 불순물은 종종 그들의 순도를 감소시켜 생물학적 활성 및 안정성에 영향을 미친다. 이 문제를 해결하기 위해 과학자들은 다양한 펩티드 담수화 기술을 개발했습니다. 그 중에서 Opentrons OT-2 피펫 팅 워크 스테이션을 기반으로 구축 된 폴리펩티드 담수화 워크 스테이션은 높은 정밀, 자동화 및 유연성의 장점으로 폴리펩티드 약물의 연구 개발 및 생산에 필수적인 도구가되었습니다.
OT-2 Peptide Decalination Workstation
1. 준비 작업 1. 장비 준비 : OT-2 피펫 팅 워크 스테이션이 우수한 작업 상태인지 확인하고 피펫, 온도 제어 모듈 (필요한 경우), 크로마토 그래피 컬럼 (사용 된 겔 여과 방법) 및 기타 액세서리가 완전하고 정상적으로 작동하는지 확인하십시오. 2. 시약 준비 : 펩티드 용액, 담수화 완충액, 용리액과 같은 필요한 시약을 준비하고 품질과 농도가 실험 요구 사항을 충족하도록하십시오. 3. 샘플 처리 : 담수화 과정의 요구 사항을 충족시키기 위해 희석, pH 조정 등과 같은 펩티드 용액의 적절한 전처리를 수행합니다.
2. 탈염 공정 1. 파이프 작동 (1) 펩티드 용액을 흡수 : OT-2의 고정밀 피펫을 사용하여 원래 용기에서 펩티드 용액을 빨아 넣고 탈염 처리를 준비합니다. (2) 담수화 장치로의 분포 : 흡수 된 폴리펩티드 용액을 투석 백, 크로마토 그래피 컬럼 또는 특정 담수화 플레이트 등과 같은 탈염 장치에 분배합니다. 2. 담수화 방법 (1) 투석 방법 : 펩티드 용액을 투석 백에 넣은 다음 투석 백을 담수화 완충제를 포함하는 용기에 넣습니다. 투석을 통해, 펩티드 분자는 투석 백에 남아있는 반면, 소분자 염은 투석 막을 통해 완충제로 확산됩니다. (2) 겔 여과 방법 : 크로마토 그래피 컬럼을 통해 펩티드 용액을 여과한다. 크로마토 그래피 컬럼의 겔 입자는 분자의 크기에 기초하여 배제 될 것이며, 펩티드 분자는 겔 입자에 유지되는 반면, 소분자 염은 용리액과 함께 흘러 나옵니다. (3) 전기 영동 (사용이 적음) : 전기장의 작용 하에서 폴리펩티드 분자는 전하 및 분자량에 따라 이동하여 염으로부터의 분리를 달성 할 것이다. 그러나 전기 영동은 복잡하고 비용이 많이 들기 때문에 펩티드의 담수화에 거의 사용되지 않습니다. 3. 자동 제어 (1) 쓰기 프로토콜 : 담수화 방법 및 실험 요구 사항에 따라 Opentrons가 제공 한 소프트웨어 플랫폼을 사용하여 맞춤형 담수 프로토콜을 작성하십시오. 프로토콜에는 피펫팅 작동, 온도 제어 설정, 용리 단계 등과 같은 자세한 정보가 포함되어야합니다. (2) 실행 프로토콜 : 서면 프로토콜을 OT-2 피펫 워크 스테이션에 업로드하고 실행을 시작하십시오. OT-2는 프로토콜의 지침에 따라 피펫 팅, 온도 제어, 용리 및 기타 측면의 단계를 자동으로 완료합니다.
3. 후속 처리 1. 폴리펩티드 수집 : 담수화가 완료된 후, 투석 백에 남겨진 폴리펩티드 용액, 크로마토 그래피 컬럼 또는 사용 된 탈염 방법에 따라 전기 영동 후에 수집하십시오. 2. 순도 감지 : 적절한 방법 (예 : SDS-PAGE, HPLC 등)을 사용하여 펩티드의 순도를 감지하여 담수화 효과가 실험 요구 사항을 충족하도록합니다. 3. 저장 및 사용 : 탈염 펩티드 용액은 후속 실험을 위해 적절하게 보존됩니다 (예 : 동결 건조, 냉장 등).
4. 예방 조건 1. 실험 조건 : 담수화 과정에서 온도, pH 및 기타 실험 조건을 엄격하게 제어하여 펩티드의 안정성 및 담수화 효과를 보장해야합니다. 2. 시약 품질 : 사용 된 시약은 펩티드의 오염을 피하거나 담수화 효과에 영향을 미치기 위해 높은 순도와 안정성을 가져야합니다. 3. 장비 유지 보수 : OT-2 피펫 팅 워크 스테이션을 정기적으로 청소하고 유지하여 장기 안정적인 작동 및 정확한 피펫 팅을 보장합니다.
OT-2에 기초하여 구축 된 펩티드 담수화 워크 스테이션은 자동화 된 피펫 팅, 유연한 탈염 방법 및 실험 조건의 정확한 제어를 통한 펩티드 담수화의 효율 및 품질을 상당히 향상시킬 수있다. 동시에, 워크 스테이션은 또한 확장 가능하고 사용자 정의 가능하며 다양한 실험 요구와 펩티드 유형의 요구 사항을 충족시킬 수 있습니다.
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