유세포 분석 샘플 준비

유세포 분석이란 무엇입니까?

유세포 분석은 세포 표면 및 세포 내 분자의 발현을 평가하는 데 사용되는 복잡한 레이저 기반 기술입니다. 그것은 연구 및 진단의 핵심이며, 개별 세포를 파라미터 분석으로 동시에 분석하여 혼합 집단에서 다양한 세포 유형을 특성화하고 세포 크기 및 부피로 측정 할 수 있습니다. 유세포 분석법은 분리 된 세포 하위 집단의 순도를 결정하고 심지어 형광 활성화 된 세포 분류 (FACS)라고 불리는 과정 인 상이한 세포 집단을 분류한다. 이것은 세포 단백질 또는 DNA에 연결된 프로피 디움과 같은 리그와 같은 리간드에 대한 형광 항체로 표지 된 세포에 의해 방출 된 형광의 강도를 검출함으로써 달성된다.

유세포 분석법은 무엇입니까?

구성 및 의도 된 응용 프로그램에 따라 유세포 분석법은 다음을 포함하여 다양한 구성 요소와 기능을 가질 수 있습니다.

• 유체 시스템 :该系统以单列方式运输细胞，确保每次只有一个细胞通过激光束进行分析。
• 원자 램프:用于在细胞穿过光束时照亮细胞。根据细胞仪的配置，可能会有多个不同波长的激光器，以便同时检测多个荧光标签。
• 광학 시스템 :该系统检测散射光和荧光。它包括镜头和滤光片，以确保检测到适当的光。
• 탐지기:将光信号转换为电子信号，常见的检测器包括用干前向散射(FSC)的光电二极管和用干侧向散射(SSC) 和荧光的光电倍增管(PMT）。
• 전자 시스템 :解释从探测器接收到的信号并将其转换为可以可视化和分析的数据点。

유세포 분석 샘플을 준비하는 방법

유세포 분석의 샘플 제조는 단일 세포 현탁액 (일반적으로 세포 배양 또는 조직 샘플로부터)을 생성 한 다음 이들 세포를 표지되지 않은 또는 형광 표지 된 항체와 함께 배양하는 것을 포함한다. 일반적인 FC 샘플 준비 방법은 다음과 같습니다.

• 밀도 구배 원심 분리 :该方法用于从血液等异质样本中分离特定细胞群，例如淋巴细胞。
• 직접 면역 형광 염색 :用荧光染料结合的抗体直接对细胞进行染色。
• 간접 면역 형광 염색 :首先用未结合的一抗对细胞进行染色，然后用识别一抗的荧光素结合的二抗对细胞进行染色。

유세포 분석 샘플 준비가 그렇게 어려운 이유 :

• 세포 활력 : 준비 중 세포 건강과 활력을 유지하는 것은 중요하지만 도전적입니다.
• 염색 특이성 : 비특이적 염색 또는 (배경) 형광이없는 형광 라벨 또는 항체의 특정 결합을 보장합니다.
• 샘플 이질성 : 여러 세포 유형 또는 상태와 혼합 된 샘플의 처리는 제조 과정을 복잡하게 할 수 있습니다.

수동 피펫 팅과 비교하여 유세포 분석 샘플 준비 자동화의 장점은 다음과 같습니다.

• 일관성 : 자동화는 균일 한 샘플 처리를 보장하고 변동성을 줄이며 반복성을 향상시킵니다.
• 효율성 : 자동화 된 시스템은 여러 샘플을 동시에 처리하여 준비 프로세스를 단순화 할 수 있습니다.
• 샘플 손실 감소 : 자동화 장비는 샘플을보다 정확하게 처리하여 손실을 최소화 할 수 있습니다.
• 신뢰성 : 표준화 된 방법을 자동화하여 인간 오류를 줄이고 샘플 준비를 보장합니다.