RNA抽出と組織の断片化の原理

分子生物学研究の分野では、RNAは遺伝情報の送信機として重要な役割を果たします。ただし、複雑な生物学的組織からRNAを効率的かつ正確に抽出することは容易ではありません。その中で、組織の断片化はRNA抽出プロセスの重要なステップであり、その原理と方法はRNAの抽出効率と純度に直接関連しています。

RNA抽出組織の断片化の原理

1。 RNA抽出のプロセスでは、組織の断片化が重要なステップの1つです。原則は、特定の試薬（グアニジンイソチオシアネート、フェノールなど）の成分を使用して細胞をすばやく溶解することです。これらの成分には強力なタンパク質変性効果があり、タンパク質を溶解し、タンパク質の二次構造を消滅させる可能性があり、それにより核タンパク質の分離を促進します。このプロセスにより、もともとタンパク質に密接に結合していたRNAを放出し、溶液状態に入ることができます。

2。主に、タンパク質を溶解し、タンパク質の二次構造を消滅させることにより、細胞を溶解する目的を達成します。 2。フェノール：フェノールは効果的にタンパク質を変性させることができ、クロロホルムと組み合わせて使用​​すると、内因性および外因性のRNaseの阻害を強化できます。これにより、RNAが分解から保護するのに役立ち、抽出されたRNAの純度が高いことを保証します。

3。補助手順と成分組織の断片化にタンパク質の変性を使用することに加えて、一連の補助ステップと成分もRNAをさらに精製および抽出する必要があります。たとえば、1。クロロホルム抽出：有機溶媒としてのクロロホルムは、細胞を素早く破壊し、ホモジネートの脂肪可溶性不純物を除去することができます。同時に、RNA酵素の活性を阻害し、タンパク質を変性させることもでき、遠心分離によって除去しやすくなります。このステップは、DNAやタンパク質などの不純物からRNAを分離するのに役立ちます。 2。イソプロパノール沈殿：イソプロパノールは、RNAの局所密度を増加させ、溶液から沈殿させるために使用されます。沈殿したRNAは、遠心分離によって収集され、比較的純粋なRNA産物を得ることができます。

4。 RNA抽出組織が壊れている場合、次の点に注意する必要があります。1。操作中に、RNA酵素のない環境を作成して、外因性RNA酵素活性の阻害を含む。これは、RNA分解のリスクを減らすのに役立ちます。 2。室温への長期暴露を避けるために、サンプル治療は迅速かつ迅速である必要があり、RNAの分解を引き起こします。 3.使用される試薬と血管は滅菌し、RNA酵素汚染を含まない必要があります。

RNA抽出と組織の断片化の原理は、主に高濃度のタンパク質変性剤（トリゾール試薬中のグアニジンイソチオシアン酸塩やフェノールなど）に依存して、細胞を迅速に切断してRNAを放出します。高純度RNA産物は、一連の補助ステップと成分の処理によってさらに精製され、抽出されます。

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