Opentrons Flex PCRワークステーションのPCR増幅プロセス

生物科学の広大な分野では、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は常に分子生物学実験の重要なツールでした。この技術は、TRACE DNAサンプルを迅速に再現でき、その後の研究のための強固な基盤を提供します。高度なロボット工学技術と正確な温度制御システムを組み合わせたOpentrons Flex PCRワークステーションにより、PCR増幅はより安定して信頼性を高めます。初心者であろうと経験豊富な科学研究者であろうと、このプラットフォームは、効率的で正確なPCR増幅を簡単に達成するのに役立ちます。

Opentrons Flex PCRワークステーション

1。実験準備段階1。設計プライマー：プロのプライマー設計ソフトウェアを使用して、ターゲットDNAシーケンスに基づいて適切なプライマーペアを設計します。プライマーの設計では、特異性、長さ、GC含有量、アニーリング温度を考慮する必要があります。 2。テンプレートDNAの準備：必要なDNAテンプレートを抽出し、その濃度と純度を決定します。テンプレートDNAの濃度と純度がPCR反応の要件を満たしていることを確認してください。 3. PCR反応システムの準備：実験要件に従って、DNAテンプレート、プライマー、DNTP（デオキシヌクレオシド三リン酸）、PCRバッファー、MGCL₂（必要な場合）、TAQ DNAポリメラーゼなどを含むPCR反応混合物を準備します。すべての成分を特定の割合で均等に混ぜ、それらをPCRチューブにアリコートします。

2。サンプルの荷重と機器の設定段階1。OpentronsFlexPCRワークステーションを予熱します：ワークステーションを開き、実験的なニーズに応じて予熱温度を設定します。 2。サンプルをロードします：準備したPCR反応混合物をPCRチューブに加えます。 PCRチューブをOpentrons Flex PCRワークステーションのサンプルホルダーに置きます。 3. PCRサイクルパラメーターの設定：ワークステーションの制御インターフェイスで、変性、アニーリング、拡張の温度と時間、およびサイクル数など、PCR増幅のサイクルパラメーターを設定します。パラメーター設定は、特定の実験要件とターゲットDNA配列の特性に従って最適化する必要があります。

3。PCR増幅段階1。変性ステップ：反応器を約93〜98°Cに加熱し、一定の期間（20〜30秒など）保持し、DNAを一本鎖に二本鎖に分離します。 2。アニーリングステップ：温度を約50〜65°Cに下げ、一定の期間（20〜40秒など）保持し、プライマーペアとテンプレートDNAシングルストランドの相補的なシーケンスを保持します。 3。拡張ステップ：温度をDNAポリメラーゼ（通常は72°C）の最適温度に上げ、一定の期間（標的DNAフラグメントの長さとDNAポリメラーゼの能力に応じて）維持するため、DNAポリメラーゼがDNTPを原料として使用して新しいDNA鎖を合成するようにします。 4.環状増幅：上記の変性、アニーリング、および拡張ステップを繰り返して、PCR増幅のサイクルを形成します。通常、PCRプロセスは25〜35サイクルを使用し、各サイクルは1回で、ターゲットDNAフラグメントの数が2倍になります。

4。増幅終了および結果分析フェーズ1。最終拡張：すべてのサイクルの後、すべての未完成のDNA鎖が完全に拡張されるように、追加の拡張ステップが72°Cで実行されます。 2。サンプルの冷却と取り外し：増幅が完了した後、Opentrons Flex Workstationは4°Cまで自動的に冷却され、この時点でサンプルを取り除くことができます。 3。結果分析：PCR産物は、ゲル電気泳動、リアルタイム蛍光定量PCR、およびその他の方法によって分析されました。電気泳動マップでDNAバンドを観察して、PCR増幅が成功しているかどうか、および増幅産物の特異性と濃度を決定します。

5。実験後の治療と機器のメンテナンスフェーズ1。作業領域の清掃：実験が完了した後、交差汚染を避けるために作業領域を時間内に清掃します。 2。データ記録：増幅曲線、電気泳動図などを含む実験結果を記録して、後続の実験の参照を提供します。 3。機器のメンテナンス：Opentronsの定期的なメンテナンスとキャリブレーションは、機器の精度と安定性を確保するためにPCRワークステーションをフレックスします。

Opentrons Flex PCRワークステーションのPCR増幅プロセスには、実験的準備、サンプルの荷重と機器のセットアップ、PCR増幅、増幅終了および結果分析、実験的な後処理と機器のメンテナンスなどの複数の段階が含まれます。各段階では、PCR増幅の精度と信頼性を確保するために慎重に動作する必要があります。

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