Opentrons Flex PCRワークステーションのPCR反応

Opentrons Flex PCRワークステーションの実用的な原則は、分子生物学技術であるPCR（ポリメラーゼ連鎖反応）の中核原理（ポリメラーゼ連鎖反応）に深く根ざしており、Opentronsの最先端の技術と革新的な成果を巧みに組み込んでいます。高度に統合された自動化システムを通じて、ワークステーションは本質的にDNAの複製プロセスを正確にシミュレートするだけでなく、実験の精度、再現性、効率を大幅に改善します。

1。PCR反応条件PCR反応条件には、温度、時間、サイクル時間が含まれます。 1。温度変性温度：一般的に90-95℃。これは、テンプレートDNAを単一の鎖に完全に変換するために使用されます。アニーリング温度：プライマーのTM値、一般に40〜60°Cに基づいて決定されます。これは、プライマーをテンプレートDNAに結合するために使用されます。伸長温度：一般的に70-75℃、DNA鎖伸長は、TAQ DNAポリメラーゼの作用の下で実行されます。 2。時間の変性時間：一般に1分など短く、テンプレートDNAを完全に変性させるのに十分です。アニーリング時間：一般的に30〜60秒。これは、プライマーをテンプレートDNAに完全に結合するのに十分です。延長時間：増幅するフラグメントの長さに応じて、一般に1〜15分。 3.通常、サイクルの数は25〜35です。

2。準備段階1。設計プライマー：ターゲットDNA配列に従って特定のプライマーを設計して、プライマーがテンプレートDNAに効率的にバインドし、増幅のためにDNAポリメラーゼをガイドできるようにします。 2。テンプレートDNAの準備：テンプレートDNAの純度と濃度がPCR反応の要件を満たしていることを確認してください。テンプレートDNAは、生物学的サンプルから抽出することも、他のソースからのDNAの断片にすることもできます。 3.反応システムの準備：PCR反応の要件に従って、テンプレートDNA、プライマー、DNTP（デオキシヌクレオシド三リン酸）、バッファー、MGCL2（必要な場合）、DNAポリメラーゼなどを特定の割合でPCR反応システムを形成するために混合します。このステップは、外来DNAからの干渉を防ぐために、核酸を含まない環境で実行する必要があります。 4。サンプルのロード：準備したPCR反応システムを、通常はPCRボードまたはPCRチューブ内のOpentrons Flex PCRワークステーションの指定位置にロードします。反応システムの体積と組成が各ウェルまたはチューブで一貫していることを確認してください。

3。プログラム設定1。デバイスを接続する：Opentrons Flex PCRワークステーションをコンピューターまたはその他の制御デバイスに接続して、デバイスが正常に通信できることを確認します。 2。ソフトウェアを起動する：Opentronsが提供するコントロールソフトウェアまたはインターフェイスを開き、PCR反応プログラムのセットアップを準備します。 3.新しいPCRプログラムの作成：ソフトウェアに新しいPCRプログラムを作成し、変性、アニーリング、拡張を含む温度、時間、サイクル時間などのパラメーターを設定します。これらのパラメーターは、ターゲットDNA配列の特性と使用されるプライマーに基づいて設定する必要があります。 Opentrons Flex PCRワークステーションは、通常、実験要件に合わせてカスタマイズできる柔軟なプログラミング機能をサポートしています。 4.プログラムを保存してアップロードします：SET PCRプログラムをOpentrons Flex PCRワークステーションに保存してアップロードします。プログラムが正しいことを確認した後、PCR反応を実行する準備をします。

4。PCR反応を実行します1。反応を開始します。ソフトウェアインターフェイスの[開始]または同様のボタンをクリックして、PCR反応を開始します。 Opentrons Flex PCRワークステーションは、プリセット手順に従って温度制御とサイクルの操作を自動的に実行します。 2。反応の監視：反応プロセス中に、ソフトウェアインターフェイスを介して反応状態と進行をリアルタイムで監視できます。 Opentrons Flex PCRワークステーションには、通常、温度曲線やサイクルなどの重要な情報をリアルタイムで表示できる強力な監視機能があります。 3.末端反応：PCR反応が事前セットのサイクルに達すると、Opentrons Flex PCRワークステーションは自動的に反応を停止します。この時点で、PCRプレートまたはPCRチューブを取り外して、その後の分析を行うことができます。

5。追跡処理1。PCR産物の分析：アガロースゲル電気泳動またはその他の適切な方法によるPCR産物の特異性と収率を分析します。増幅された製品が予想されるサイズと数量を満たしていることを確認してください。 2。データの記録と照合：PCR反応の結果とデータを記録し、必要な照合と分析を実行します。これらのデータは、その後の実験的検証または科学的研究に使用できます。 3。クリーニングとメンテナンス：PCR反応を完了した後、Opentrons Flex PCRワークステーションと関連機器をタイムリーにクリーニングして、汚染と損傷を防ぎます。同時に、機器の性能とステータスを定期的にチェックして、機器が長時間安定して動作できることを確認します。

上記の手順は、一般的なPCR反応原理とOpentrons Flex PCRワークステーションの機能特性に基づく一般ガイドであることに注意してください。特定の操作については、Opentrons Flex PCRワークステーションのユーザーマニュアルを参照するか、正確なガイダンスについてOpentronsテクニカルサポートチームに連絡してください。

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