ELISAテストのタイプと図

エリサはもともと、スウェーデンのストックホルム大学のエヴァ・エンヴァルとピーター・ペルマン、アントン・シュアーズとオランダのバウケ・ヴァン・ウィーメンによって独立して考案されました。彼らは、放射性免疫アッセイが潜在的に危険な放射標識抗原または抗体を使用したため、放射性免疫測定法の代わりに抗原または抗体の存在を決定できる免疫アッセイを求めたため、酵素ベースの代替を設計しました。

elisaテストの種類

現在、4つのメインELISAタイプ、直接的な方法、間接的な方法、サンドイッチ方法、競争方法があります。次の写真は、抗原の測定を示しています。ただし、抗原と一次抗体が反対を行うことを除いて、同じ原理が適用されます。

ELISA Direct Method ELISA直接法では、サンプルの抗原または抗体は、非特異的な方法でコーティングされたプレートに直接吸着されます。次に、特定のアッセイ抗体または抗原が井戸に連結されます。次に、アッセイ基板を使用して測定可能な色の変化を生成し、プレートリーダーで定量化します。この検出方法は、ステップが少なく、速度が高く、他のELISAメソッドよりもエラーを導入する可能性が少ないためです。ただし、吸着ステップは非特異的であるため、バックグラウンドノイズが高くなる可能性があります。二次抗体段階がないことは、シグナル増幅がなく、検出感度を低下させることを意味します。また、それぞれの目的の標的に対して共役アッセイ抗体/抗原の作成が必要です。

ELISA間接法 ELISA間接法、またはIELISAは、最初にヒト血清アルブミンを検出するために開発されました。これにより、テスト信号が増幅され、ELISA直接法の制限が克服されます。また、共役二次抗体は一次抗体に特異的な種であるだけである必要があるため、抗体/抗原の標的固有の共役アッセイの必要性も無効にします。総サンプル抗原がコーティングされたプレートに結合している場合、ELISAダイレクト法のように、バックグラウンドノイズは問題のままです。ただし、アッセイ法を使用してサンプル抗体を検出すると、精製された標的抗原がプレート上でコーティングされ、一次抗体はサンプルに由来します。これにより、バックグラウンドノイズが大幅に減少するため、これらのアッセイは、サンプルの抗体力価を決定する際に最も人気があります。 ELISA間接的な方法の欠点には、レジメン時間の長い時間、エラーの機会が増え、二次抗体との交差反応の可能性が含まれます。

Elisa Sandwich Method Elisa Sandwichメソッドは、抗体間の抗原をサンドイッチし、ELISA直接的または間接的な方法で使用できます（ELISAサンドイッチ法は、ELISA Indirect Matingに基づいています。プロセス。この組み合わせにより、検出の感度と特異性がさらに向上します。ただし、効果的に機能するには、互換性のある捕獲およびアッセイ抗体ペアを決定する必要があり、交差反応に問題がある可能性があります。この検出方法には通常、ほとんどの手順があり、エラーの可能性が高くなります。抗原結合ステップの選択性により、ELISAサンドイッチ法は、抗原を精製する必要がないため、抗原が複雑な混合状態にある場合に特に役立ちます。

ELISA競争法 ELISA抑制法またはELISAブロッキング法としても知られるELISA競争法は、ELISAテクノロジーの最も複雑なものかもしれません。もともと1976年にヒト絨毛性ゴナドトロピンを検出するために開発された検出方法は、予想される出力信号レベルへの干渉を検出することにより逆関係を生み出します。適用されたサンプルにはより多くのターゲットがあるほど、測定された出力信号が低くなります。他のELISAメソッドは、競合方法に変更することもできます。ここには、サンプル抗原または抗体がそれぞれ参照と競合し、限られた数の標識抗体または抗原に結合します。 ELISAの競争法は、それが取る形と同様に、同じ利点と短所をいくつか持っています。ただし、その効果は、抗原が小さいときに強調され、2つの抗体が同時に結合する能力を制限します（ELISAサンドイッチ法で要求されます）、または1つの抗体のみが利用可能な場合です。

ELISAテストのタイプには独自の特性があり、適切なテスト方法を選択することは、実験結果の精度を確保するための鍵です。直接的なELISA、間接ELISA、サンドイッチELISA、または競争力のあるELISAであろうと、それらはすべて独自のアプリケーションシナリオと利点を持っています。実際には、研究者は、サンプルタイプ、実験目標、必要な感度などの要因に基づいて選択する必要があります。バイオテクノロジーの進歩により、ELISAテクノロジーも常に改善されており、医療、科学研究、公共安全の分野に強力なサポートを提供しています。

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