in vitro DNA増幅の原理と方法

DNAは遺伝情報の担体であり、その構造と機能は常にライフサイエンス研究の焦点でした。 in vitro DNA増幅技術は、DNAの謎を明らかにするための強力なツールを提供します。この技術により、科学者は、詳細な分析と研究のために、研究室でDNAを迅速に複製できます。 DNA増幅の習得により、遺伝子の役割と遺伝情報の伝達をよりよく理解することができます。

in vitro DNA増幅の原理

1.基本原則in vitro DNA増幅の基本原理は、細胞内のDNAの半保持複製のメカニズムと、二本鎖および一本鎖DNA分子が異なる温度で互いに変換できる特性に基づいています。 in vitro合成システムの温度を人為的に制御することにより、二本鎖DNAは一本鎖に変わり、その後、DNAポリメラーゼの作用の下で、単一型材料として使用されるDNTP（デオキシリボヌクレオシドの材料として使用されます。

2。主な方法現在、in vitro DNA増幅のために最も一般的に使用される方法は、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）です。 PCRテクノロジーは、1985年にKarrayなどの学者によって最初に作成され、米国のCetusによって開発されました。 PCRテクノロジーの基本的なステップには、1。高温変性：高温（94〜98°Cなど）で増幅されるDNAの二重鎖を1つの鎖に増幅して、プライマーに結合するための単一の鎖に含まれます。このステップの時間は、使用されるポリメラーゼに依存します。 2。低温アニーリング：反応温度が低温（50〜65°Cなど）に低下すると、人為的に合成されたプライマーが相補的なDNA一本鎖配列との水素結合を形成し、DNAテンプレートに結合します。アニーリング温度は、使用されるプライマーのTM値（融解温度）に依存します。 3。中温度伸長：DNTPを原料として使用して、DNTPを使用してDNAポリメラーゼ（TAQ DNAポリメラーゼなど）の作用下で、プライマーは、DNAテンプレートの5 '→3'方向に沿ったテンプレートDNA鎖を補完する新しい鎖を合成します。延長中の温度は通常、約72°Cです。上記のステップはサイクルを形成し、このサイクルを継続的に繰り返す（通常は30〜35回）繰り返すことで、関心のあるDNAフラグメントを効率的かつ迅速に増幅できます。

3。アプリケーションと機能1。アプリケーション：in vitro DNA増幅技術は、多くの分野で広く使用されています。医学的診断では、病原体、遺伝的遺伝子などを検出することができます。 2。特徴：in vitro DNA増幅技術は、特異性と感度が高く、非常に少量のDNAサンプルを増幅することができます。同時に、この技術には、単純な動作、高速反応、正確な結果の利点もあります。

生物学的研究と応用の重要な技術として、in vitro DNA増幅技術は大きな進歩を遂げました。正確なDNA増幅を通じて、科学研究者は、ゲノミクス、医学、農業などの多くの分野の開発を促進する遺伝子の詳細な調査と正確な動作を達成できます。

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