タンパク質の定量的測定方法カテゴリ

定量的タンパク質測定、つまり、サンプルのタンパク質濃度の正確な決定を通じて、科学的研究者に貴重な実験データを提供します。科学技術の継続的な進歩により、タンパク質の定量的測定方法も、化学、分光法、生物学などの複数の分野をカバーする日ごとに変化しています。

タンパク質の定量測定方法

1。キルダールの窒素測定方法：タンパク質は、窒素を含む有機化合物であり、硫酸と組み合わせて硫酸アンモニアを形成し、硫酸を吸収します。酸の消費に基づいています。機能：操作は複雑ですが、結果は比較的正確であり、古典的なタンパク質定量化方法の1つです。 2。biurea法の原理：タンパク質を使用して生物尿素試薬と反応して紫色の青色の複合体を形成し、特定の波長で吸光度を決定してタンパク質含有量を計算します。機能：操作が簡単で、中濃度のタンパク質溶液の測定に適しています。 3。フェノール試薬法の原理（フォリンフェノール法）：タンパク質のチロシン残基は、基本条件下でフェノール試薬と反応して青色化合物を形成し、吸光度は特定の波長で測定されます。機能：高感度ですが、比較的面倒な操作。

2。分光法法1。UV吸収の原理：タンパク質のチロシン、トリプトファン、フェニルアラニンは、タンパク質溶液の濃度を決定するために使用できる280nm波長で特徴的な最大吸収を持っています。特徴：操作が簡単で、追加の試薬は必要ありませんが、核酸などの不純物によって邪魔される場合があります。 2。蛍光法の原理：特定の蛍光染料がタンパク質に結合した後の蛍光強度の変化は、タンパク質含有量を決定するために使用されます。特徴：高感度と良好な選択性ですが、サンプル内の他の蛍光物質によって妨害される場合があります。

3。比色法1。クーマシーの原理明るい青い方法：クーマシーブライトブルー染料がタンパク質に結合した後に色が変化し、タンパク質含有量は色の変化を測定することによって計算されます。機能：操作が容易で、高感度、さまざまなタンパク質タイプに適しています。 2。BCA法の原理（ジキノリンカルボン酸法）：アルカリ条件下では、二価銅イオンはタンパク質から一価銅イオンに還元され、一価銅イオンはBCAと反応して紫色の反応錯体を形成し、タンパク質含有量は吸収を測定することで計算されます。特徴：高感度、幅広い検出範囲、さまざまな種類のタンパク質に適し、洗剤などの化学物質の影響を受けません。

4。生物学的方法1。低リッチーの方法とその誘導体の原理：タンパク質質量は、特定の生物の成長、分裂、または変化に及ぼすタンパク質の効果を使用して、タンパク質と生物間の関係の変化を測定することにより測定されます。特徴：高感度、優れた再現性、しかし比較的複雑な操作。

5。さらに、コロイドゴールド法、銀色の染色法など、他の方法がいくつかあります。これらの方法は、特定の特定の条件下でタンパク質の定量的測定にも使用できます。

6。注1。特定の定量的タンパク質測定方法を選択する場合、実験目的、サンプル特性、実験条件などの要因に基づいて包括的な考慮を行う必要があります。 2。核酸、洗剤などのさまざまな要因によって異なる方法が妨害される可能性があるため、実験を実施する場合は、実験結果に対するこれらの要因の影響を制御することに注意する必要があります。 3.実験を実施する前に、実験の正確性と信頼性を確保するために、関連する方法の動作ステップと予防措置を注意深く読む必要があります。

タンパク質の定量的測定には多くの方法があり、それぞれに独自の原則と適用範囲を備えています。古典的な化学的方法から最新の分光法、生物学的方法、および新たな新しい技術まで、これらの方法の継続的な進歩は、サンプルのタンパク質含有量を決定するためのより多様で正確な手段を研究者に提供します。実際の用途では、科学研究者は、実験目的、サンプル特性、実験条件、および費用対効果を包括的に考慮し、タンパク質の定量的測定に最適な方法を選択する必要があります。

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