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磁気ビーズソートは、標的物質への磁気粒子(磁気ビーズ)の特異的結合に基づく実験技術であり、標的物質は外部磁場によってすぐに分離および精製されます。この技術は、生物学、化学分析、医療診断などの分野、特に核酸、タンパク質、細胞などの分離と精製で広く使用されています。
1.基本原理磁気ビーズソートは、磁気ビーズ(磁気ビーズ)と標的物質(細胞表面の特定の抗原など)の間の特異的結合を使用して、外部磁場の作用下での標的物質の分離と精製を実現します。磁気ビーズは通常、鉄酸化物(Fe3O4など)または他の磁気材料で作られており、標的物質との親和性を高めるために、表面に特定の分離物質(抗体、親和性リガンドなど)があります。
2。操作の手順磁気ビーズのステップには、一般にサンプル処理、磁気ビーズ結合、分離、溶出が含まれます。1。サンプル処理:細胞溶解、タンパク質抽出などの細胞サンプルを前処理して、標的物質を放出するか、細胞を適切な選別状態に置きます。 2。磁気ビーズの結合:徹底的な混合後、特定の抗体で修飾された磁気ビーズを追加します。 3。分離:外部磁場の適用により、磁気ビーズとその組み合わせた標的物質は特定の位置に集中し、それにより標的物質と非標的物質の分離を達成します。 4。溶出:必要に応じて、磁気ビーズと標的物質の間の結合は、変化する条件(pH、イオン濃度など)によって破壊され、それにより純粋な標的物質が溶出します。
3.ソートメソッドは、チューブベースまたはカラムベースの方法を使用して実行できます。 2。カラムに基づく磁気分離法:磁石の分離列から磁気標識された細胞の懸濁液を分離します。分離柱の磁場は標識された細胞をキャプチャし、非標識細胞は液体とともに流れ出されます。
4。保持または分離されたコンテンツに応じたソートタイプは、磁気ビーズの並べ替えを2つの方法に分割できます:正のソートとネガティブソート:1。肯定的なソート:標的集団として収集する必要がある細胞を選択し、標的細胞に直接ラベルを付け、外部磁場を使用してこれらの細胞を分離を分離するか、それを達成するために吸着するか、そこから分離を実現します。この方法は高速で、操作が簡単で、純度が高く、回復率が高く、標的細胞に強い特異性を持つ表面マーカーがある場合に適しています。 2。ネガティブソート:非標的細胞に標識してそれらを除去することにより、間接的に標的細胞を取得します。このアプローチは、標的細胞の直接標識から生じる可能性のある細胞活性化の問題を回避し、特定の細胞亜集団または標的細胞の表面に特定の抗体がない状況に適しています。
5.アプリケーションフィールド磁気ビーズ選別技術は、DNA、RNA、タンパク質などの生物学的分子の分離と精製など、医学、生物学、薬物研究開発、および酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)、特定の細胞タイプの分離などの免疫アッセイの実施など、他の分野で広く使用されています。細胞生物学および臨床研究では、磁気ビーズの並べ替えが高品質の細胞選別の標準的な方法になっています。
磁気ビーズのソートは、その原則と動作手順を比較的単純で明確にすることができます。
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