C18クロマトグラフィーカラムの使用方法

C18クロマトグラフィーカラムのフルネームは、逆位相クロマトグラフィーカラムであるOctadeCylsilane結合シリカクロマトグラフィーカラムです。その中で、「C18」とは、固定相の化学構造、つまりクロマトグラフィーカラムフィラーはオクタデシルシラン結合相であり、このクロマトグラフィーカラムの固定相は、化学結合オクタデシル官能基を介してシリカゲルマトリックスに吸着されます。 C18クロマトグラフィーカラムの原理は、C18フィラーの表面の化合物の親水性の違いに基づいて、溶媒勾配溶出による化合物の分離を達成することです。具体的には、非極性キャリアの表面には疎水性特性があり、偏光溶媒化合物には通常、有機溶媒と緩衝液が含まれています。

C18 Chromatographic列の使用方法

1。新しいカラムの活性化1。すすぎ：使用前に、新しいカラムは、低流量で純粋な有機試薬（メタノールやアセトニトリルなど）ですすいでいる必要があります。 2。抗綿療法処理：純粋なメタノールまたはアセトニトリル溶液に新しいカラムを浸すには、少なくとも30分間表面を完全に接触させます。ほとんどの残留有機物を洗い流した後、純水または75％のメタノールまたはアセトニトリルで2〜3回洗い流して、出力液が無色で無臭になるまで。 3。酸塩基洗浄処理：抗綿療法処理が完了した後、0.11％の酢酸溶液を使用してクロマトグラフィーカラムの表面に落下し、約30分間滞在し、DI水で完全に洗い流します。次に、アミノ含有サンプルを0.11％のアンモニア溶液でカラムに吸着させ、約30分間オンにしました。その後、出力を安定させるためにDI水で押し出されました。 4。勾配溶出：カラムに1：1のモル比でイソプロパノールとギ酸の混合物を加え、勾配溶出は0.5 mL/min（10％B、3分、40％B、3分、95％B、3min、3分間で10％にリセット）の流量で、オープンなコロイドのファスター回復を可能にします。

2。毎日の使用1。サンプル処理：サンプルが適切に処理されて不純物と干渉物質を除去して分離効果を改善することを確認してください。 2。移動相の選択：実験要件に従って、適切な移動相組成と割合を選択します。 3。流量制御：適切な流量を制御して、分離効果に影響を与える過度に高い流量または低い流量を避けます。 4。圧力監視：使用中に、クロマトグラフィーカラムの圧力変化の監視に注意を払い、異常な状況を迅速に検出して対処します。

3。列のすすぎ：毎日の実験の後、列が酸または塩を含む場合、カラムの酸または塩は通常、カラムのボリュームの20％をすすぐことをお勧めします。 2。高水相条件を避ける：C18カラムの固定相（極性修飾処理を除く）は非常に疎水性であるため、水相の比率が高すぎる場合、定位相の疎水性崩壊を引き起こすことができます。水相比は、使用中に90％を超えてはならないことをお勧めします。 3.再生処理：カラムの圧力が上昇し、カラムの性能が低下すると、カラムの再生処理は列の有効性を回復できます。

4.長期保管1。すすぎ：クロマトグラフィー列を、長い間保管前に3〜4時間以上前にすすぐ。 2。溶媒を保存：純粋な有機試薬または有機試薬溶液の高い割合（90％メタノール水など）に保管します。翌日の使用を続ける必要がある場合は、溶媒をできるだけ毎日保管しておくようにしてください。

5。注意事項1。激しい振動を避けてください：クロマトグラフィー柱の損傷を避けるため。 2。乾燥の予防：長い間使用されていない場合は、クロマトグラフィーカラムに適切な溶媒で満たされていることを確認し、乾燥と汚染を防ぐために両端のプラグを密封してください。 3.サービス寿命：C18クロマトグラフィーカラムのサービス寿命は、出力結果のピーク形状がぼやけ、出力の安定性が低下すると、新しい列を時間内に交換してください。

6.よくある質問と解決策1。塩漬けの問題：C18クロマトグラフィーの列を使用すると、塩漬けが発生する可能性があります。これは通常、カラムの移動相中の塩の沈殿によって引き起こされます。この問題を解決するために、高塩に耐性のある比例バルブを使用したり、カラムサーモスタットの設置を使用したり、移動相の組成を最適化するなどの測定値をとることができます。

2。柱の詰まり：カラムの閉塞は別の一般的な問題です。これは、移動相中の不純物の堆積、サンプル中の不溶性物質、またはカラムの緩衝塩が原因である可能性があります。この問題を解決するために、洗浄を防ぐために、保護柱またはフロントカラムフィルターを使用するために、フラッシングに高い水相を使用するなどの測定値が採取できます。カラムが既にブロックされている場合は、バックフラッシュや超音波クリーニングなどの方法を使用して回復してみることができます。ただし、コアと特定のタイプに注意してください

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