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生物医学研究と臨床診断の分野では、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)技術は、その効率的で敏感な特性を備えた特定のDNAフラグメントを増幅するための重要なツールになりました。ただし、従来のPCR実験における面倒な動作ステップと可能な人工誤差は、多くの場合、実験の精度と効率を制限します。この課題を克服するために、OpentronsはOT-2 PCRワークステーションを革新的に開始しました。これは、実験の精度と効率を改善することを目的とした、自動ピペッティングと精密温度制御という2つの主要な技術を統合します。 Opentrons OT-2 PCRワークステーションの作業原則と操作プロセスについては、以下で詳しく説明します。
1.作業原則1。PCRテクノロジーの原則:(1)PCRテクノロジーは、一連の酵素の作用を通じてDNA複製プロセスをシミュレートする分子生物学技術です。 (2)その特異性は、ターゲットシーケンスの両端に相補的なオリゴヌクレオチドプライマーに依存し、迅速なDNA増幅は、変性と拡張の3つの基本的なステップを通じて完了します。 2。自動ピペッティングプラットフォーム:(1)自動ピペッティングプラットフォームとして、Opentrons OT-2はピペットの動きと動作を正確に制御でき、それによりPCR反応液の正確な準備とサンプルの正確なサンプル充填を実現できます。 (2)プログラミング制御を通じて、OT-2は複数のPCR反応の調製を自動的に完了し、実験効率と精度を改善できます。
2。ワークフロー1。試薬の準備:(1)試薬の保管と準備エリアで、汚染のないピペット、ガンヘッド、容器を使用して試薬アリコートと準備を使用します。 (2)すべてのPCRシステムが-20°Cで保存され、濃度に影響を避けるために使用する前に試薬成分を完全に溶かすことを確認します。 2。サンプルの準備:(1)サンプルを受信する場合、サンプルのシーリングと一意の数を確認してください。 (2)バイオセーフティキャビネットでサンプル操作を実行し、バイオセーフティキャビネットの消毒とアイテムの排出に注意してください。 (3)反応システムの安定性と精度を確保するために、核酸増幅反応のために良質のEPチューブを選択します。 3. PCR反応溶液の調製:(1)OT-2自動ピペッティングプラットフォームの実験要件に従って、PCR反応溶液を準備します。 (2)テンプレートDNA以外の試薬を予備した後、それらを各PCRチューブにアリコートして、反応システムが一貫していることを確認します。 4.テンプレートDNAの追加:(1)テンプレートDNAを徹底的に混合した後、Opentrons OT-2自動ピペッティングプラットフォームを使用して、サンプルをPCRチューブに正確に追加します。 (2)サンプル負荷プロセス中の相互汚染とバブル生成を防ぐように注意してください。 5. PCRプログラムの実行:(1)反応システムを装備したPCRチューブをPCR増幅機器に入れ、適切な温度条件と時間パラメーターを設定します。 (2)PCRプログラムを開始し、変性、アニーリング、拡張の3つのステップで周期的増幅を実行します。 (3)PCRプロセス中、Opentrons OT-2ワークステーションは、反応プロセスを監視し、PCR増幅機器とのインターフェースを介してリアルタイムで結果をもたらすことができます。 6.製品分析:(1)PCRプログラムが完了した後、アガロースゲル電気泳動分析またはその他の適切な分析方法が増幅産物で実行されます。 (2)分析結果に基づいたPCR増幅の特異性と効率を判断する。
3。注1。PCR操作全体で、汚染やエラーを避けるために実験条件を厳密に制御する必要があります。 2。高品質の試薬と消耗品を使用して、実験の精度と信頼性を確保します。 3. Opentrons OT-2ワークステーションを定期的に維持および調整して、通常の動作と精度を確保します。
Opentrons OT-2 PCRワークステーションは、PCRテクノロジーのコア原理と自動ピペッティングプラットフォームの利点を組み合わせることにより、効率的かつ正確なPCR操作を実現します。そのワークフローには、試薬の準備、サンプルの準備、PCR反応溶液の準備、テンプレートDNAの追加、PCRプログラムの実行および製品分析が含まれ、その他の手順には、実験条件の厳格な制御と実験結果の精度と信頼性を確保する必要があります。
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