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生物医学研究の分野では、生物学的に活性な分子の重要なクラスとして、ポリペプチドの純度と品質は、薬物研究開発と治療効果に不可欠です。しかし、ペプチド合成中に生成される無機塩やその他の不純物は、しばしばその純度を低下させ、それによって生物学的活動と安定性に影響を与えます。この問題を解決するために、科学者はさまざまなペプチド淡水化技術を開発しました。その中で、OTENTRONS OT-2ピペッティングワークステーションの上に構築されたポリペプチド淡水化ワークステーションは、高精度、自動化、柔軟性の利点を備えたポリペプチド薬の研究と生産において不可欠なツールとなっています。
1。準備作業1。機器の準備:OT-2ピペッティングワークステーションが適切な動作状態であることを確認し、ピペット、温度制御モジュール(必要に応じて)、クロマトグラフィーカラム(ゲルろ過法を使用する場合)およびその他のアクセサリが完全で機能しているかどうかを確認してください。 2。試薬の準備:ペプチド溶液、淡水化緩衝液、溶離液などの必要な試薬を準備し、その品質と濃度が実験要件を満たしていることを確認します。 3.サンプル処理:淡水化プロセスの要件を満たすために、希釈、pHの調整など、ペプチド溶液の適切な前処理を実行します。
2。脱塩プロセス1。パイプ操作(1)ペプチド溶液を吸収:OT-2の高精度ピペットを使用して、元の容器からペプチド溶液を吸い出し、脱塩処理の準備をします。 (2)淡水化装置への分布:透析バッグ、クロマトグラフィーカラム、特定の淡水化プレートなど、吸収されたポリペプチド溶液を淡水化装置に分配します。 2。脱塩法の選択(1)透析方法:ペプチド溶液を透析バッグに入れ、透析袋を淡水化緩衝液を含む容器に入れます。透析を通じて、ペプチド分子は透析袋に残りますが、小さな分子塩は透析膜を介して緩衝液に拡散します。 (2)ゲルろ過方法:クロマトグラフィーカラムを介してペプチド溶液をろ過します。クロマトグラフィーカラムのゲル粒子は、分子のサイズに基づいて除外され、ペプチド分子はゲル粒子に保持され、小分子塩は溶出感とともに流出します。 (3)電気泳動(使用不能):電界の作用下では、ポリペプチド分子は電荷と分子量に応じて移動し、それにより塩からの分離を達成します。ただし、電気泳動は、複雑で費用がかかるため、ペプチドの脱塩にはめったに使用されません。 3。自動制御(1)書き込みプロトコル:脱塩法と実験要件に従って、Opentronsが提供するソフトウェアプラットフォームを使用して、カスタマイズされた淡水化プロトコルを作成します。プロトコルには、ピペッティング操作、温度制御設定、溶出ステップなどの詳細情報が含まれている必要があります。 (2)実行プロトコル:書かれたプロトコルをOT-2ピペッティングワークステーションにアップロードし、実行を開始します。 OT-2は、プロトコルの指示に従って、ピペッティング、温度制御、溶出、その他の側面の手順を自動的に完了します。
3。その後の処理1。ポリペプチドを収集:淡水化が完了した後、透析袋、クロマトグラフィー列に残ったポリペプチド溶液を収集し、使用した脱塩法に従って電気泳動後に収集します。 2。純度検出:適切な方法(SDS-PAGE、HPLCなど)を使用して、ペプチドの純度を検出して、淡水化効果が実験要件を満たしていることを確認します。 3。保存と使用:脱塩ペプチド溶液は、その後の実験のために適切に保存されています(凍結乾燥、冷蔵など)。
4。注意事項1。実験条件:淡水化プロセス中に、ペプチドの安定性と淡水化効果を確保するために、温度、pHおよびその他の実験条件を厳密に制御する必要があります。 2。試薬の品質:使用される試薬は、ペプチドの汚染を避けるため、または淡水化効果に影響を与えるために、高い純度と安定性を持つ必要があります。 3。機器のメンテナンス:OT-2ピペッティングワークステーションを定期的に清掃して維持し、長期の安定した操作と正確なピペッティングを確保します。
OT-2に基づいて構築されたペプチド淡水化ワークステーションは、自動ピペッティング、淡水化方法の柔軟な選択、実験条件の正確な制御を通じて、ペプチド淡水化の効率と品質を大幅に改善できます。同時に、ワークステーションは非常にスケーラブルでカスタマイズ可能であり、さまざまな実験的ニーズとペプチドタイプの要件を満たすことができます。
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